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编号:1254258
232例急性白血病流式细胞术免疫表型分析
http://www.100md.com 2020年6月29日 实验与检验医学 2020年第3期
髓系,分型,抗原,1资料与方法,2结果,3讨论
     吴琼,王小中

    (南昌大学第二附属医院检验科,江西 南昌 330006)

    急性白血病(Acute leukemia,AL)是血液系统的恶性肿瘤,是造血细胞某一克隆被阻滞在某一分化发育阶段上并异常增殖的结果[1]。白血病的免疫分型为白血病的预后判断和化疗方案的选择提供了科学的依据,同时对微小残留病的检测也具有十分重要的意义。本文采用四色流式细胞术,对232例江西地区急性白血病进行了免疫分型检测,现报告如下。

    1 资料与方法

    1.1 临床资料 收集 2015 年 9 月至 2017 年 10 月来我院血液就诊的白血病患者232 例。其中男127例,女 105 例,年龄 16~65 岁,中位年龄 38.4 岁。

    1.2 主要仪器和试剂 采用美国BD 公司FACSCalibur 流式细胞仪。

    1.3 主要试剂 FITC 标记的 IgG、CD2、CD4、CD7、CD14、CD15、CD56、HLA-DR、IgM、MPO、TdT,PE 标记 的 IgG、CD1a、CD5、CD8、CD10、CD13、CD22、CD23、CD64、CD117、HLA-DR,Percp 标记的CD45,APC 标记的 IgG、CD3、CD11b、CD19、CD20、CD33、CD34 单克隆荧光抗体,溶血素、破膜剂及鞘液,以上试剂均购自BD 公司。

    1.4 方法 采集EDTA 抗凝的的骨髓标本1~2ml。胞膜表面抗原染色:先在上样管中各加入EDTA抗凝的骨髓标本50μl,按白血病免分型4 色方案添加荧光抗体 (其中 FITC、PE、Percp 标记的抗体为20μl,APC 标记的抗体为 5μl),用涡旋振荡器轻微的振荡5s,充分混匀,室温下避光孵育15min;然后加入1ml 溶血素, 振荡混匀后室温避光溶血10 min;到时间后放入离心机离心5min,转速设定为1500rpm;最后弃上清,沉淀用PBS 洗涤两次即可上机检测。胞内抗原染色:先在上样管中各加入EDTA 抗凝的骨髓标本50μl, 再添加CD45-Percp荧光抗体,按上诉方法进行膜表面抗体染色 ......

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