张玉洲，孙少霖，杨璇

    (1.开封市妇产医院妇科，河南 开封475000；2 开封市妇产医院病理科，河南 开封475000)

    子宫内膜癌(endometrial carcinoma，EC)是一种子宫内膜上皮细胞恶性病变，EC 好发于围绝经期和绝经后的女性,其发病率在女性生殖系统疾病中排名第三[1]。 Wingless/β-连环蛋白(Wnt/β-cate nin)通路参与调节细胞增殖、细胞存活、细胞迁移和侵袭等细胞行为,已经有研究证实在EC 中Wnt/β-catenin 通路被过度激活可以促进肿瘤的增殖和转移[2]。 尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase type plasminogen activator，uPA)是一种丝氨酸蛋白酶,参与细胞外基质纤维蛋白的溶解, 与肿瘤细胞的上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT) 以及肿瘤的转移密切相关[3,4]。 有研究发现Wnt/β-catenin 和uPA 的表达与EC 的病理学特征和预后有关， 但是关于Wnt/β-catenin 通路及uPA在EC 中的作用机制尚不明确[5]。 本文主要分析Wnt/β-catenin、uPA 在调节EC 细胞迁移和侵袭中的机制，报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 细胞、试剂和材料 人EC 细胞株KLE 购自北纳生物(中国)。 DMEM 培养基以及胎牛血清购自Gibco(美国)。 KLE 细胞株来自一位68 岁的女性，是未分化的、II 型的子宫内膜腺癌细胞株。 Wnt-1过表达和uPA 沉默质粒由上海Genepharma 公司建造(中国)。 LipofectamineTM 2000(Invitrogen，美国)。CCK-8 试剂盒购自Dojindo(日本)。酶标仪型号ELX 800,公司为Bio-Teck(美国)。Trans-well 小室(Millipore,美国)。 Anti-Wnt-1(ab15251,41 kD)、anti-β-catenin (ab16051，94 kD)、anti-uPA(ab169 754，48 kD)、anti-β-actin (ab8226，42kD) 均来自Abcam 公司(美国)。Trizol(Invitrogen，美国) ......