付宗强，牛小斌，张汇征，李永伟

    (1.河南省中医院 河南中医药大学第二附属医院检验科，河南 郑州450002；2.重庆市公共卫生医疗救治中心中心实验室，重庆 重庆400036)

    过敏性哮喘是哮喘的主要类型,它以慢性气道炎症为特征，多种细胞及细胞因子参与，包括T 淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞等，及这些细胞所分泌的细胞因子所形成的复杂的免疫调节网络[1,2]。目前研究认为Th2 细胞及其细胞因子谱可以调节过敏性气道炎症，导致气道的高反应性，Th1/Th2细胞失衡对于气道重构有促进作用[3]。 最近研究表明IL-9 在过敏性哮喘的进展过程中也起到重要的调节作用，IL-9 起初被认为是Th2 类细胞因子，它可以由IL-2、IL-4 和TGF-β 诱导产生，而被IFNγ 抑制[4]，但是研究发现IL-9 主要来自于一个新的细胞亚群，这个新的CD4+细胞亚群并不表达现有Th 细胞亚群的转录因子[5,6]，因此被称为Th9 细胞。本研究建立了小鼠哮喘模型, 检测小鼠肺组织中Th9 细胞相关因子的变化，进一步探讨Th9 细胞及其细胞因子在过敏性哮喘中的免疫调节作用。

    1 材料与方法

    1.1 小鼠过敏性哮喘模型的建立 SPF 级雌性BALB/c 小鼠24 只(购自河南省实验动物中心)，6~8w 龄，体重18~22g，用随机数字表将其分为对照组和哮喘模型组， 每组12 只。 模型组小鼠在第1天和第14 天腹腔注射0.2ml 卵白蛋白溶液(OVA，Grade Ⅴ,Sigma A5503)进行致敏，在第28~30 天将小鼠置于自制的5L 容器中超声雾化吸入1%浓度的OVA 进行激发，每天激发一次，每次20min，对照组则用同等体积的生理盐水代替处理。0.2mlOVA 致敏液含20μg OVA 和0.1ml 液态铝佐剂(Imject Alum，Thermo Pierce)。

    1.2 小鼠气道反应性检测 末次激发24h (第31天)后，应用全身体积描记仪无创肺功能检测系统(Whole-body Plethysmograph, WBP，Buxco 公司)检测小鼠气道增强的呼吸间歇 (enhanced pause,Penh)。 将两组小鼠分别用生理盐水和梯度浓度的乙酰甲胆碱(Mch，Sigma A2251)进行激发后，转入WBP 中记录Penh 值, 并计算Penh%值 (Penh%=Mch 激发后的Penh/生理盐水激发后的Penh×100%) ......