吴伟全，李元歌，唐金凤，王思捷，杨腾，吴平

    (广东医科大学附属医院，广东 湛江 524001)

    普通荧光显微镜和普通共聚焦显微镜系统能采集生物组织样本的荧光图像[1-4]，但它们都没有超分辨成像功能，不可以获取超分辨率荧光图像。随着显微镜系统的不断发展，出现新型的超分辨率共聚焦系统，具有超分辨率图像重构(Super-Resolution Image Reconstruction，SR)与 CI 反卷积(Constrained Iterative Deconvolution)成像新技术，但由于超分辨率图像重构及CI 反卷积成像技术处于起步阶段，类似研究罕见，因此需进一步探索其使用价值。 本实验拟用超分辨率图像重构共聚焦成像技术对蒿草样本的荧光图像进行采集，并使用其软件cellSens 的CI 反卷积功能处理图像，分析超分辨率图像重构与CI 反卷积共聚焦成像技术检测生物组织样本超分辨率荧光图像的使用价值。

    1 材料与方法

    1.1 主要仪器和相关样本 DMI3000B 荧光倒置显微镜(德国莱卡公司)；TCS SP5 II 共聚焦显微镜系统(德国莱卡公司)；新型FV3000 共聚焦显微镜系统(日本奥林巴斯公司)，配有OSR 超分辨图像重构及CI 反卷积模块。蒿草样本(德国莱卡公司)，为DAPI、FITC 及TRITC 荧光染色后固定在载玻片上。

    1.2 实验分组 根据不同显微镜类型及成像技术分为四组:1 组:荧光倒置显微镜采集蒿草样本荧光图像；2 组: 普通共聚焦系统采集蒿草样本荧光图像；3 组: 新型共聚焦系统超分辨率图像重构技术采集蒿草样本超分辨率荧光图像；4 组: 新型共聚焦系统CI 反卷积功能处理蒿草样本超分辨率荧光图像 ......