李俊明，徐炜

    (1.南昌大学第一附属医院检验科；2.江西省医疗服务指导中心，江西 南昌 330006)

    结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb) 感染导致的一种严重危害人类健康的感染性疾病。世界卫生组织(WHO)最新的研究报告显示，尽管结核病疫情已得到一定的遏制，全球每年仍有约1000 万的新发病例, 约100-140万人死于结核病。尤其值得警惕的是，结核病的耐药形势日益严峻。目前, 大约3.3%的新发病例和17.7%的经治复发病例为耐多药结核病(即同时对利福平和异烟肼耐药)[1]，而研究显示，相对于初治和非耐多药的复治结核病患者83%的治愈率，耐多药结核病和广泛耐药结核病治疗的成功率显著降低，分别为54%和30%[2]。

    早期发现结核病患者并给予有效的治疗是控制结核病疫情的关键环节。目前，结核病的诊断主要基于临床表现、影像学检查和实验室检查。由于结核病,尤其是肺外结核的临床表现和影像学特征均不是很典型,实验室检查在结核病的诊断中发挥重要作用。目前，结核病诊断和药敏分析应用最广泛的方法仍然是细菌学方法,主要包括痰涂片抗酸染色和结核分枝杆菌培的培养。痰涂片抗酸染色的敏感性差,且无法区分结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌。培养法的敏感性较痰涂片抗酸染色有显著提高，但耗时过长，一般需要3～4 周获得阳性结果, 如果加上药敏分析的时间通常需要6～8 周时间。细菌学检查的这些不足极大地限制了结核病的及时诊断和药敏分析。WHO 估计，目前全球每年约有300 万的结核病患者因未获得诊断而被遗漏[1]，而且，即使在获得细菌学确诊的结核病患者中也仅有三分之一进行了药敏分析检测,大多数患者接受的是经验性的治疗。因此，快速而准确的结核病诊断新技术的开发和应用对于结核病的诊断和治疗,以及全球结核病疫情的防控均具有重要意义。

    近年来,分子生物学技术的快速发展给结核病的早期诊断和快速药敏分析产生了巨大的推动作用,一系列新的分子诊断技术正在或即将进入临床应用。目前，已有多种分子诊断平台经过了WHO的论证并获得WHO 的推荐，另外还有多种新近发展的分子诊断平台虽未获得WHO 推荐但已经获批在临床应用,这些分子诊断技术的发展和应用有望进一步增强结核病的临床诊断和药敏分析能力，同时大大缩短检测时间，促进结核病的早期诊断和合理治疗。

    1 基于核酸扩增试验的结核病诊断及药敏分析技术

    基于核酸扩增试验 (nucleic acid amplification tests, NAATs) 的结核病诊断技术是指通过聚合酶链式反应技术 (polymerase chain reaction, PCR)对结核分枝杆菌复合群的特异性基因序列或耐药相关基因进行靶向扩增和分析,借以对结核病进行诊断和耐药性分析的技术 ......