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编号:429234
沙门氏菌H鞭毛抗原纯培养和位相变异方法改进及效果的分析
http://www.100md.com 2021年3月24日 实验与检验医学 2021年第1期
琼脂,阳性率,1材料与方法,2结果,3讨论
     赵卫红,黄曾,邹锦群,詹卓蓬,丁欣悦,龚怡静

    (1.丰城市疾病预防控制中心检验科,江西 丰城331100;2.武汉体育学院研究生院健康科学院,湖北 武汉430079)

    沙门氏菌可以通过水源、食物等途径引起食物中毒,败血症等病,85%的食物中毒是由沙门氏菌引起[1]。GB29921-2013《食品安全国家标准食品中致病菌限量》中沙门氏菌是主要限量菌之一,且限量为0cfu/25g或ml,为所有微生物限量标准中的最严格级[2]。

    沙门氏菌对人类的威胁已超过数百年,全球每年有超过1亿人感染。在亚太地区,每10万人中有32人感染,其中东亚地区最严重,每1O万人中有3600人感染,全球每年因沙门氏菌而死亡的人数高达15.5 万人,死亡率居亚洲国家和东南亚国家最高[3]。我国每年至少200万人感染沙门氏菌,造成成千上万人住院,数百人因此而死亡[4]。据世界卫生组织报告,世界各国沙门氏菌食物污染日益严重,造成巨大经济损失[5]。

    近年来沙门氏菌检测与分型手段有了长足进步,但大部分是基于核酸的分子生物学等检测技术,这些方法门槛要求高,成本贵,限制了其在基层应用[6]。在基层常用的传统检测方法中,血清学分型是沙门氏菌命名及菌株溯源的关键步骤,但实际检测过程中沙门氏菌的血清分型工作量大、步骤繁杂,灵敏度低,尤其是沙门氏菌H鞭毛抗原难以检测,常需诱导多次[7],导致整个检测过程耗时长、易出错、成本高[8],人员劳动强度大。有报道显示,沙门氏菌H鞭毛抗原较易发生H-O变异[7],而H鞭毛抗原如何恢复表达的有关报道很少[1]。所以,实现H鞭毛抗原的快速、低成本、高成功率的诱导表达对沙门氏菌的快速检测和分型具有十分重要的意义。本研究探讨沙门氏菌H鞭毛抗原纯培养和H鞭毛抗原诱导方法的改进,使沙门氏菌的血清学分型工作省时、简单、高效、成本低,现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 试验菌株 ⑴2020年3月-5月份对禽类、水产品等120份样品做沙门氏菌检测获得14株沙门氏菌菌株:有典型生化反应、A-F O多价阳性、O单因子抗原鉴定阳性、需要鉴定H鞭毛抗原的沙门氏菌菌株。⑵其他16份已经血清学分型鉴定了的沙门氏菌菌株来自江西省疾病预防控制中心和宜春市疾病预防控制中心。⑶试验标准菌株是由省疾病预防控制中心提供。

    1.2 试验试剂PCA、布氏肉汤、BPW(缓冲蛋白胨水)、SC(亚硒酸盐胱氨酸)、TTB(四硫磺酸钠煌绿)、BS(亚硫酸铋)、沙门氏菌显色琼脂平板、沙门氏菌生化鉴定试剂、半固体、双糖铁(青岛高科技园海博生物技术有限公司)、沙门氏菌诊断血清(宁波天润生物药业有限公司)等 ......

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