游雪云，刘艳秋，吴敏

    (1.江西省妇幼保健院产前诊断中心，江西 南昌 330006；2.临川区第一人民医院检验科，江西 抚州 344100)

    神经管畸形(NTD)是胚胎神经管无法完成正常闭合而导致的一种先天畸形,其中多不饱和脂肪酸(PUFA)代谢调节紊乱是导致NTD 发生的最重要原因，长链多不饱和脂肪酸(LCPUFA)是神经系统的重要结构组分，尤其是ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3-PUFA)，但其功能目前尚不清楚。我们的前期研究发现：ω-3-PUFA 代谢产生的类花生酸TXA2、PGl2 能够参与调控营养物质由母亲经胎盘到胎儿的转运,同时促进Hcy 代谢中一些关键基因；Hcy升高可以激活Wnt/β-catenin 信号通路，可能在神经管发育过程中发挥作用。鉴于此,笔者团队于2019年1 月至2020年9 月在江西省妇幼保健院中心实验室以ω-3-PUFA 为切入点,通过不同饲料喂养的孕鼠腹腔注射VPA 建立起VPA 鼠模型，探讨ω-3-PUFA在Hcy 协同下调控Wnt/β-catenin信号通路预防神经管畸形中的功能和作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料 清洁级6 周龄ICR 小鼠(雌鼠50 只，雄鼠25 只)由南昌乐悠生物科技有限公司提供，孕期所需的橄榄油强化饲料由江苏美迪森生物医药有限公司加工。VPA:≥98%，Sigma-Aldrich Co.LLC.总蛋白测定试剂盒:A045-2，由南京建成生物工程研究所提供。Hcy 代谢通路中关键基因(CASC2c、MTHFR、CSE和CSCA2)mRNA表达检测所需试剂为UNIQ-10 柱式Trizol 总RNA 抽提试剂盒，PCR引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。

    1.2 实验方法

    1.2.1 qRT-PCR 检测目的基因mRNA的表达通过Primer bank 搜索目的基因的引物，使用NCBI数据库进行blast 比对后，由上海生物有限公司合成。取新鲜的胎盘组织约50mg ......