王洪玉，任红娟，陈霞

    (1.南阳市社旗县妇幼保健院妇产科，河南 南阳 473300；2.南阳市中心医院妇产科，河南 南阳 473000)

    宫颈癌是最常见的女性生殖器官恶性肿瘤，具有较高的发病率和致死率。手术切除、放疗、化疗是宫颈癌主要的治疗方法,然而这些治疗方法副反应较大，严重影响患者的生活质量。近年来，天然植物或其主要成分的抗肿瘤作用受到日益关注。褐藻多糖硫酸酯(Fucoidan)是从褐藻中提取的一种硫酸化多糖，主要由岩藻糖和硫酸基组成，具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎等多种生物活性[1]。研究显示，褐藻多糖硫酸酯可能通过下调HDAC1表达诱导胃癌细胞凋亡[2]；褐藻多糖硫酸酯通过调控p38 MAPK/ERK和PI3K/Akt 信号通路诱导肝细胞癌细胞凋亡并抑制细胞增殖[3]。目前,褐藻多糖硫酸酯对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制还未知。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度超过200 个核苷酸的小分子非编码RNA，其参与调控细胞的增殖、凋亡、迁移等多种生命过程,与人类疾病尤其是肿瘤的发生发展密切相关[4,5]。增殖细胞核抗原的反义RNA1(proliferating cell nuclear antigen antisense RNA1，PCNAAS1)是近年来新发现的一种lncRNA，在结直肠癌、胃癌、肝细胞癌等肿瘤中表达升高，参与肿瘤的发生发展[6-8]。目前，还未见PCNA-AS1 影响宫颈癌发生发展的相关报道。本研究以宫颈癌Hela细胞为研究对象,主要观察了褐藻多糖硫酸酯对Hela细胞增殖和凋亡的影响及其能否调控PCNA-AS1表达发挥抗宫颈癌作用,以期为其用于宫颈癌的治疗提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 细胞和实验试剂 褐藻多糖硫酸酯，纯度>99.0%,货号140193，上海西宝生物科技股份有限公司；宫颈癌Hela细胞株，货号TCHu187，中国科学院上海细胞库；胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)，货号11011-8611，浙江天杭生物科技有限公司；RPMI 1640 培养基，货号31800，北京索莱宝科技有限公司；PCNA-AS1的小干扰RNA(si-PCNAAS1)及乱序无意义阴性序列(si-NC)、PCNA-AS1过表达载体(pcDNA-PCNA-AS1)、空载体(pcDNA)，广州锐博生物科技有限公司；LipofectamineTM 2000 试剂盒(货号11668-027)和Trizol试剂(货号15596-026)美国Invitrogen 公司；逆转录试剂盒(货号K1622) ......