廖志华，刘静，李书琪，姚芳苡，黄波，章海斌，张静，王小中

    (1.江西省妇幼保健院检验科，江西 南昌 330006；2.江西省检验医学重点实验室 南昌大学第二附属医院检验科，江西 南昌 330006)

    慢性髓性白血病 (chronic myeloid leukemia,CML)是造血干细胞水平发生的恶性骨髓增殖性疾病[1]。伊马替尼(Imatinib，IM)是目前CML 治疗的首选药物，显著改善了CML 的预后，然而约20%患者伴随出现的化疗耐药已成为其治疗的最主要障碍[2]。 目前，针对CML 的IM 耐药机制研究主要有BCR/ABL 过度表达和点突变[3]、下游信号通路异常[4]、膜转运蛋白介导药物外排[5]以及CML 干细胞[6]等，以这些理论为指导的耐药治疗手段在临床上难以达到满意的疗效。

    RNA 表观遗传学中N6-甲基腺嘌呤(m6A)修饰是一种通过影响mRNA 剪切、稳定、翻译等过程改变细胞正常的分化途径,可导致肿瘤的发生和药物反应的改变。 多项研究报道，m6A 与肺癌[7]、肝癌[8]等实体瘤的发生发展相关，是肿瘤近年研究领域的新方向， 而有关其与CML 的研究鲜有报道。 因此，本项目分析m6A 修饰酶METTL14 在不同时期CML 细胞中的差异表达， 以期通过甲基化的思路来阐明CML 耐药机制。

    1 材料与方法

    1.1 研究对象及试剂

    1.1.1 临床标本 根据《慢性髓性白血病中国诊断与治疗指南(2020年版)》[9]作为CML 诊断标准。 选取本课题组前期实验已保存的同一份标本[10]，继续收集南昌大学第二附属医院首次就诊的门诊患者标本，IM 敏感的CML 样本30 例和IM 耐药的CML 标本10 例。 所有标本的使用均符合南昌大学第二附属医院伦理委员会的伦理要求。

    1.1.2 试剂 伊马替尼 (Imatinib，IM) 购自Sigma Aldrich 公司，PrimeScriptTM RT Master Mix 逆转录试剂盒购自日本Takara 公司 ......