游雪云，刘艳秋

    (江西省妇幼保健院医学遗传中心 江西省出生缺陷防控重点实验室，江西 南昌 330006)

    据报道，全球大约10~15%的夫妇患有不育不孕，而男性方面的因素大概占30~55%[1-2]。 有研究表明男性发生不育的原因较多且较繁杂， 如精索静脉曲张[3-5]、性激素分泌功能紊乱[6-7]、生精管道梗阻[8-9]、遗传因素[10-11]和营养不良等[12]，其最终引起精子质量的下降、 精子密度的减少甚至无精症是导致男性不育的最主要原因。 弱精症是一种危胁男性生殖健康的疾病， 同时也是困扰全球的一个医学难题。 生精细胞氧化应激是导致弱精症的一项重要原因，我们的前期研究发现Pim2/c-Myc 高表达于弱精症睾丸组织， 但其在生精细胞氧化应激中的作用尚未明确。 为了研究弱精症精子Pim2/c-Myc 蛋白与活性氧导致的氧化应激损伤关系，我们收集了弱精症患者和正常志愿者精液， 采用免疫印迹方法对精子Pim2/c-Myc 蛋白表达进行检测，并通过荧光探针检测精子ROS 含量，以阐明Pim2/c-Myc 蛋白与ROS 的关系及确认Pim2/c-Myc 蛋白的表达和弱精症间的相关系。

    1 资料与方法

    1.1 研究对象 收集2020 年1 月至12 月我院(江西省妇幼保健院) 生殖医学中心进行精液常规检查标本进行研究。 弱精症患者共计76 例，弱精症患者的诊断标准为：A 级精子 (快速前向运动)10%，中度弱精症组(n=34)A 级精子<10%，其他精液常规参数正常。 正常对照组共50 例，正常对照组标准：(1)连续三次精液常规检查结果：PR≥32%； 同时PR+NP≥40%，精子的密度≥15×106/mL；(2)各项临床检测指标均在正常范围内；(3)各项性激素检测值均在正常范围内；(4)无先天性、损伤性生殖系统疾病。所有受试者标本均经江西省妇幼保健院伦理委员会批准， 受试者均被告知实验目并签署知情同意书。

    1.2 试剂 Percoll 液(Pharmacia ......