斯志娟，雷震

    (南昌大学附属感染病医院 南昌市第九医院，江西 南昌 330002)

    人类非自限性病毒感染性疾病的病因学治疗手段有限，目前，大多依赖核苷(酸)类似物破坏病毒(逆)转录，干扰或终止病毒核酸的合成，达到抗病毒的作用。如HBV[1]、HCV[2]、HIV[3]等。核苷(酸)类似物不能清除病毒，但可通过长期抑制病毒复制，耗尽病毒库的方式，达到清除病毒的目的。核苷(酸)类似物治疗的理想停药时机是体内病毒库被耗尽，这就促使临床对核酸检测灵敏度无限高的期望(检测下限无限地接近于0)[4]。有研究证实[5]，抗HBc阳性的隐匿性HBV感染的献血者血液中含有0.15 IU/mL的HBV DNA，即可导致受血者感染。当前临床检测技术采用磁珠法富集核酸[6-7]，以提高原始样本扩增量。数字PCR技术[8]采用流体芯片或微滴技术等方式分配成单拷贝靶核酸扩增，通过计数阳性孔数目的方式进行核酸绝对定量检测。我们采用批分析(多管同测)法对低浓度(载量)样本进行核酸扩增检测，以期建立一种新的低浓度(载量)核酸检测方法。

    1 材料与方法

    1.1 样本来源 我院就诊患者HBV DNA检测后剩余血清约1.5 mL，检测结果约2×103IU/mL。

    1.2 仪器功与试剂 SlAN-96S全自动医用PCR分析系统(上海宏石医疗科技有限公司)。乙型肝炎病毒核酸实时荧光定量PCR检测试剂(批号：2021019，圣湘生物科技股份有限公司)；核酸释放剂(批号：2021019，圣湘生物科技股份有限公司)；细胞保存液(批号：12021003，圣湘生物科技股份有限公司)。

    1.3 实验方法

    1.3.1 将上述样本分装在离心管中-20±5℃冷冻保存，每管130μL。

    1.3.2 梯度浓度样本盘的选择 取一份样品用细胞保存液稀释成1∶10、1∶100、1∶1 000、1∶10 000的梯度浓度样本 ......