基于BDNF-SYN 轴探讨功能性电刺激对脑梗死大鼠学习记忆能力及认知能力的作用
试剂盒,1材料与方法,2结果,3讨论
胡琪苓,魏艳霞,贾东佩,汪宁,张辉(1.南阳市中心医院康复医学科,河南 南阳 473000;2.郑州大学附属郑州中心医院,河南 郑州 450000)
脑梗死主要由动脉粥样硬化及高血压小动脉硬化导致,引发血管病变,血液成分改变,病死率约10%~15%,致残率极高且易复发[1]。脑源性神经营养因子(BDNF)是人脑中与空间学习相关的重要物质,神经营养因子中的一种,存在于人的神经系统中,由BDNF 基因合成[2]。突触素(SYN)是一种完整的膜糖蛋白,主要分布于大脑、脊髓、视网膜的突触前小泡,也出现在肾上腺髓质小泡及神经肌肉连接点,参与突触囊泡的形成和胞吐[3]。BDNF-SYN 轴在神经系统的发育、分化及突触可塑性中发挥重要作用[4]。脑梗死目前主要依靠药物进行降压、溶栓治疗,但预后较差,患者常有中枢神经系统异常引起的后遗症[5-6]。功能性电刺激通过低频脉冲电流刺激神经肌肉,同时刺激传入神经,将重复的运动信息传入中枢神经系统,在大脑皮层形成兴奋痕迹,逐渐恢复原有的运动功能,进行功能重建[7-8],但在体内作用机制尚不明确。本研究通过闭塞大脑中动脉构建大鼠脑梗死模型,观察功能性电刺激对脑梗死大鼠学习记忆及认知能力的影响,并初步探讨其调控机制。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 SPF 级雄性SD 大鼠,60 只,5 周龄,体质量250~350 g,购自山东斯科贝斯生物科技股份有限公司,许可证号SCXK(鲁)2016-0001。
1.1.2 药物、试剂 10%水合氯醛(西安众森医药有限公司)、HE 染色试剂盒(北京索莱宝科技有限公司)、SYBR Green 预混染料,反转录试剂盒(美国Thermo Fisher 公司),兔抗鼠BDNF、SYN 抗体(美国Abcam 公司),ECL 发光试剂盒(美国Biorad 公司),蛋白定量试剂盒(南京诺唯赞生物科技有限公司)。
1.1.3 仪器 LC480 荧光定量PCR 仪(美国Roche公司),电泳系统(上海天能生命科技有限公司),Nano drop 2000 紫外分光光度计(美国Thermo Fisher 公司),化学发光成像仪(美国Bio-rad 公司),脑立体定位仪(美国stoelting 公司),CM1850切片机(日本Lecia 公司),E600 显微镜(日本尼康公司),Morris 水迷宫实验系统(北京众实迪创有限公司)。
1.2 方法
1.2.1 动物分组 60 只大鼠随机分为3 组 ......
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