李宁，崔中锋，李琤

    (河南省传染病医院，河南 郑州 450000)

    肝癌是世界上第五大最常见的癌症， 也是全球第三大与癌症相关的死亡原因[1]。 尽管近年来在肝癌诊断和治疗方面取得了不错的进展， 但肝癌患者长期预后仍然很差， 晚期肝癌患者5 年生存率低于5%[2]。 证据表明，肝内复发和转移是影响肝癌患者预后不良的危险因素[3]。 但肝癌复发和转移的分子机制尚未完全阐明。 肝癌发生和发展与包括microRNAs 在内的多种基因有关。 microRNA 是一类长度为21～25 个核苷酸的内源性小RNA，可在转录后水平或翻译水平上负调控基因表达，从而参与调控细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等多种细胞生物学过程[4]。研究显示，micRNA-126 在胃癌[5]、肺癌[6]、前列腺癌[7]等多种肿瘤中下调表达，可能发挥抑制肿瘤发生和发展的作用。 亦有文献报道，micRNA-126 在肝癌组织中的表达显著低于癌旁组织和正常组织， 且micRNA-126 低表达是影响肝癌患者预后不良的独立因素[8]。但有关micRNA-126 影响肝癌细胞生物学功能作用的报道较少。本研究旨在分析探讨micRNA-126 对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及其相关机制，现详细报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 动物和细胞株 16 只BALB/c 裸鼠(4～5 周龄)购买自上海斯莱克实验动物有限公司，体质量16～22 g，实验动物合格证号：SYXK(沪)2019-0008，人肝 癌 细 胞 株HepG2、MHCC97-L、PLC、Huh7 以 及人肝细胞株L02 购买自中国科学院上海细胞库，micRNA-126 mimics 和micRNA-126 NC 均购买自上海吉玛制药技术有限公司。

    1.2 试剂和仪器 胎牛血清、 胰蛋白酶消化液、DMEM 培养基、青霉素-链霉素溶液(批号或货号分别为：SV30184.02、J160030、AB216496、SV30010。美国Hyclone 公司)；MTT、二甲基亚砜(批号或货号分别为：303H0523、D8371。北京索莱宝科技有限公司)；转染试剂Lipofectamine 3000(批号或货号：L3000-015。 美国Invitrogen 公司)；蛋白酶抑制剂(批号或货号：P7626。 美国Sigma 公司)；膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素 (Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)细胞凋亡检测试剂盒(批号或货号：A211-01。南京诺唯赞生物科技有限公司)；PrimeScriptTM RT reagent 试剂盒 (批号或货号：RR037A ......