不同稀释介质对乙型肝炎病毒表面抗原定量检测的影响
稀释液,增幅,生理盐水,2结果,3讨论
陈明心,王炜,张岱,任伟宏(河南中医药大学第一附属医院,河南 郑州 450000)
在目前临床检验工作中, 血清HBsAg 浓度已经可以使用全自动化免疫检测系统进行检测,但是很多检测体系的检测范围(例如雅培)仅仅为1 材料和方法
1.1 标本选取 选取LiCA500 上检测HBsAg 为阳性的样本50 份(HBsAg 血清浓度覆盖0.2~500 μg/L 范围), 无明显溶血、 脂血和胆红素血; 另选择HBsAg 浓度较高的病人血清(>500 μg/L)51 份,各自随机寻找阴性血清将其进行稀释配制成混合血清,该51 份混合血清浓度覆盖0.2~500 μg/L 范围。
1.2 稀释液 选取四种稀释液:(1)0.85%~0.90%的生理盐水;(2)BSA, 可根据需要配制成不同浓度;(3)BGG,可根据需要配制成不同浓度;(4)随机阴性血清(要求HBsAg 和HBsAb 同时为阴性)
1.3 仪器 光激化学发光全自动免疫分析仪器(Li-CA500,博阳公司)
1.4 试剂 LiCA500 配套HBsAg 检测试剂,包含试剂A 和试剂B,以及LiCA 检测系统共用通用液
1.5 实验方法
1.5.1 不同稀释介质对稀释结果的影响 将101 份HBsAg 阳性样本分别用生理盐水,50 g/L BSA、15 g/L BGG 以及随机阴性血清进行3 倍稀释。 稀释方法为病人血清30 μL +稀释液60 μL,充分混合均匀后,使用LiCA500 检测。按照试剂配套说明书,检测过程为加入25 μL 样本、25 μL 试剂A、25 μL 试剂B,反应15 min 后,加入175 μL 通用液,反应17 min 后,由仪器检测发光值,再根据校准曲线自动获得HBsAg 浓度, 将以上稀释后得到的检测结果乘以3, 得出通过稀释后计算获得的HBsAg 浓度(以C1 来表示) ......
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