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编号:1682029
SARS-CoV-2 核酸提取前样本混匀后不同静置时间对假阴性结果影响的初步探讨
http://www.100md.com 2023年12月20日 实验与检验医学 2023年第4期
1材料与方法,2结果,3讨论
     梁丽霞

    (肇庆市第一人民医院检验科,广东 肇庆 526060)

    SARS-CoV-2 核酸RT-PCR 是目前COVID-19 病[1]的确诊方法,但影响检测结果的因素较多。我们在实验室核酸检测工作中发现, 样本提取前充分振荡混匀后静置时间对治疗后期或恢复期的确诊患者的实验结果有着很大的影响。 在患者治疗后期及恢复期,病毒量急剧减少,但仍有少量存留于鼻咽内部细胞的情况下, 不同的样本处理方法决定着结果的可靠性。 实验结果报告如下:

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 试剂与仪器3 mL 自带灭活效果的病毒保存液(广州邦德盛生物科技有限公司),去RNA 酶EP管(AXYGEN),半自动核酸提取仪(重庆中元汇吉生物技术有限公司)和配套的核酸提取试剂盒(磁珠法,型号B-200),SARS-CoV-2 核酸检测试剂盒(荧光PCR 法,中山大学达安基因股份有限公司),ABI7500 PCR 仪(Applied Biosystems USA)。

    1.1.2 样本来源 样本来源于本院收治的1 例女性COVID-19 确诊患者, 该患者住院时间是2020 年2 月17 日至3 月5 日,入院前鼻塞、流涕、咽痛8天,咳嗽7 天,发热3 天,新型冠状病毒核酸检测结果阳性,胸部CT 平扫结果提示左肺上叶少许炎症。 在此病人住院治疗期间,感染科医生为了监测治疗效果,在病人签署知情同意书的情况下,每天采集一个鼻咽拭子到我们实验室进行新型冠状病毒核酸检测, 采集后的样本立即保存在灭活病毒保存管中,4 ℃保存及时送检。 将此病人入院后治疗的前6 d 设为治疗初期,这期间送检的6 个鼻咽拭子分别编号为1、2、3、4、5、6,设为A 组。 在出院前一周的治疗设为治疗后期, 这期间送检的6 个鼻咽拭子分别编号为7、8、9、10、11、12,设为B 组。

    1.2 方法

    1.2.1 加样提取操作 实验人员严格按照《国家卫生健康委办公厅关于印发新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版)的通知》及《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南(第四版)》相关文件进行实验操作和生物安全防护 ......

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