王茜莎 杨威 陶淑娟 董金华 潘雪刁 张德志

    榄香烯(elemene)是从姜科植物温莪术(CurcumawenyujinY. H. Chen et C. Ling)的挥发油中经减压蒸馏获得的以β-榄香烯为主，同时含少量δ-榄香烯及γ-榄香烯等成分的萜烯类化合物，属国家二类非细胞毒性抗肿瘤药物[1]。目前临床使用的榄香烯乳剂是以β-榄香烯为主要成分。δ-榄香烯是β-榄香烯的同分异构体，实验研究表明δ-榄香烯能诱导人宫颈癌Hela细胞发生凋亡[2]，但对人结肠腺癌DLD-1细胞的抗肿瘤作用至今未见报道。本实验在董金华等[3]大量提取δ-榄香烯工艺的基础上，初步进行了δ-榄香烯对DLD-1细胞的抗肿瘤作用研究。

    1 材料

    1.1 药品与试剂

    δ-榄香烯和β-榄香烯均由沈阳药科大学制药工程学院提供，其含量分别为95%、96.7%；用DMSO溶成8 mmol/L临用前储备液，用时培养基稀释为适当浓度用于体外实验。

    3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)、左旋谷胱甘肽(L-Glutathione，GSH)购于Sigma公司； 氯甲基二氯荧光素二乙酸酯(6-Chloromethyl-2′，7′-dichlorofluorescin diacetate, CM-H2DCF-DA)和超氧化物阴离子荧光探针(dihydroethidium，DHE)和四氯四乙基苯并咪唑基羰花青碘化物(5,5′,6,6′-tetrachloro-1,1′,3,3′-tetrethyl benzimidalyl carbocyanine iodide，JC-1)购于美国Molecular Probes公司。

    1.2 细胞及培养

    人结肠腺癌DLD-1细胞、人正常肝胚胎WRL-68细胞购于American Type Culture Collection 机构。接种在含10%胎牛血清、2 mmol/L谷氨酰胺、100 U/ml 青霉素和100 μg/ml链霉素的RPMI-1640培养液中，在37℃，5%的 CO2环境下培养。

    1.3 动物

    5～6周龄SPF级昆明种小鼠，雄性，18～22 g，由广东省实验动物实验中心提供[许可证号：SCXK(粤)2003-0002，粤监证字2007A006]。

    2 方法

    2.1 细胞体外生长活性检测

    采用MTT法进行。取对数生长期的DLD-1细胞 ......