倪晨 王贵均 王倩 赖小平

    肾小球硬化(glomerulosclerosis，GS)是肾小球疾病发展至终末期，肾功能衰竭的主要病理改变。其中细胞外基质(ECM)降解减少、过度积聚，是GS的重要发病机制[1,2]。在ECM降解调控系统中发挥重要作用的是基质金属蛋白酶MMP和基质金属蛋白酶抑制物TIMP[3](MMPs-TIMPs)系统，随着TIMP-1表达增强，MMP-9降解作用减弱，MMP-9/TIMP-1的比值失调，最终形成肾小球硬化。此外，细胞因子在GS的形成过程中也起着非常关键的作用，其中转化生长因子[4]TGF-β1的调控作用尤为重要。TGF-β1既能促进ECM合成增加，又能抑制ECM的降解，最终导致ECM聚积，形成肾小球硬化。本研究基于肾络癥积理论，采用祛瘀化痰、散结消癥的治疗方法，配伍川芎、鳖甲、海藻[6-8]，考察祛瘀化痰、散结消癥中药复方对肾小球硬化大鼠肾功能的作用。

    1 材料与方法

    1.1 仪器

    超净工作台(苏净集团苏州安泰空气技术有限公司)，CO2恒温培养箱(美国harris公司)，倒置显微镜(日本Nikon公司)，酶联免疫检测仪(BIORAD smartspec 3000型)，电子精密天平(上海精密科学仪器有限公司)，荧光定量PCR仪(ABI 7300)、Effendorf 冷冻离心机。

    1.2 试药

    川芎、鳖甲、海藻，购自康美药业股份有限公司。经广州中医药大学中药学院中药鉴定教研室鉴定后使用。称取川芎、鳖甲、海藻各20 g，分别置于1000 ml圆底烧瓶中，以10倍量水回流提取两次，每次1.5小时，滤过，洗涤滤渣，合并两次过滤液和洗涤液，浓缩至1.5 g·ml-1、1.0 g·ml-1、0.5 g·ml-1，分别为高、中、低浓度药液，置于4℃备用。

    盐酸阿霉素，浙江海正药业股份有限公司，批号：09015，临用前用生理盐水配制为1 mg·ml-1；福辛普利钠片，施贵宝制药有限公司，批号：H20090262，粉碎后用蒸馏水配制成0.33 g·ml-1的溶液。MMP-9酶联免疫吸附法检测试剂盒、TIMP-1酶联免疫吸附法检测试剂盒(美国RB公司)、First Strand cDNA Synthesis Kit(Fermentas公司) ......