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编号:1421174
筋脉通胶囊对糖尿病大鼠阴茎组织一氧化氮合成酶表达的影响
http://www.100md.com 2011年6月11日 环球中医药 2011年第5期
免疫组化,1材料与方法,1实验动物,2实验药物和试剂,3动物模型的建立和分组干预,4体重及血糖检测,5标本处理,6免疫组化染色及检测方法,7统计学分析,2结果,1一般情况,血糖及体重,2nNOS及iNOS
     朴元林 梁晓春 吴群励 孙连庆 屈岭 王普艳 赵丽

    近年来的临床研究证实神经病变在糖尿病勃起功能障碍的发病中起着非常重要的作用[1,2]。已有研究表明糖尿病病人及糖尿病模型动物的阴茎组织中神经型一氧化氮合成酶(nNOS)表达减低,提示存在勃起神经损害[3,4]。本课题组既往研究发现中药筋脉通胶囊能够改善糖尿病周围神经病变,提高糖尿病周围神经病变患者及链尿佐菌素诱导的糖尿病(STZ-DM)大鼠的坐骨神经的神经传导速度,增加STZ-DM大鼠周围神经组织的神经生长因子mRNA转录及其蛋白的表达[5],具有神经保护作用。本研究采用STZ-DM大鼠模型,观察筋脉通对其阴茎组织NOS表达的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    8~9周龄清洁级健康雄性Wistar大鼠,体重230~265 g,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,动物合格证号:京2007-0001。

    1.2 实验药物和试剂

    筋脉通胶囊(由菟丝子、女贞子、桂枝、水蛭、元胡、细辛等药物组成),为中国医学科学院北京协和医院院内制剂,由北京九龙制药厂加工生产,每粒含生药0.35 g,批准文号(97)京卫药制加字[48]第F-292 号,生产批号061019。链脲佐菌素(STZ)购自Calbiochem公司。神经妥乐平(NEUT)购自日本脏器制药株式会社,每片含4NU,批准文号S20040071,生产批号06180。兔抗鼠nNOS单克隆抗体购自abcam公司,批号ab76067;iNOS兔抗鼠多克隆抗体,AGEs兔抗鼠多克隆抗体及3,3二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒购自博士德公司。

    1.3 动物模型的建立和分组干预

    60只雄性Wistar大鼠,适应性喂养1周后,随机取其中10只为正常组。禁食12小时后按60 mg/kg一次性腹腔内注射0.45%的STZ溶液(pH 4.2),72小时后测血糖≥16.7 mmol/L为糖尿病造模成功。将糖尿病模型大鼠再随机分为模型组、筋脉通小剂量组、筋脉通中剂量组、筋脉通大剂量组及神经妥乐平组 ......

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