川木通与其混伪品和近缘种的ITS2条形码分子鉴定
铁线莲,1材料与方法,2方法,2结果与分析,1川木通基原植物的ITS2序列长度,GC含量及种内变异,2川木通及其主要混伪品的鉴定,3川木通与其同属近缘种的鉴定,3讨论
刘美子 李美妮 姚辉 刘萍川木通为较常用中药,主产于四川等地,具有清热利尿,通经下乳等功效。2010版《中国药典》收载的川木通为毛茛科植物小木通(ClematisarmandiiFranch.)或绣球藤(ClematismontanaBuch.-Ham.)的干燥藤茎[1]。由于本草中记载的异物同名,同物异名和地方用习用品等原因,商品川木通的品种混乱情况较为严重[2],包括毛茛科铁线莲属、木通科木通属(如木通)、马兜铃科马兜铃属(如关木通)等多种植物的藤茎,其中木通与川木通在有效成分、药理作用和主治功能上虽有相似之处[3],但功效各有侧重,应区别使用。关木通由于肾毒性而被禁用后,川木通的需求量日益增大 ,而药典收载的绣球藤生长海拔较高,市场上流通的川木通实际上常混有木通或铁线莲属的多种植物的藤茎[4]。川木通与木通为不同科属的植物,依靠外观形态或显微鉴定可明显区分,但与同属混伪品和近缘种则需要寻找一种快速、准确的分子鉴定方法,以确保临床的安全用药,近年发展起来的DNA条形码技术在近缘种鉴定方面显示出了明显的优势。
DNA条形码技术是随着分子生物学和生物信息学的发展而出现的物种鉴定新技术。它是利用一段短的标准的DNA序列作为标记而建立的物种鉴定方法,目前已被广泛应用于药用植物鉴定[5-8]。nrITS序列常用于不同分类阶元的系统进化研究,尤其是属水平或属下水平的研究[9],nrITS由ITS1、5.8S、ITS2三部分构成,Chase等[10]研究表明,ITS2序列与ITS序列的物种鉴定效率相当,但其序列长度只有ITS的1/3,因此具有较高的扩增效率,ITS2已成为热点的条形码候选序列[11-13]。本文应用ITS2序列对川木通及其混伪品和近缘种进行分析,为近缘物种的分子鉴定提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
川木通基原植物绣球藤及其混伪品木通、三叶木通、棉团铁线莲的的新鲜叶片分别采自四川汶川、成都、南充,广西南宁和北京,由中国医学科学院药用植物研究所林余霖副研究员进行鉴定,硅胶干燥保存,材料信息详见表1。此外,从GenBank下载了川木通与其混伪品和近缘种的ITS2序列 ......
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