金泉克 许建华 肖海娟 陆海 余文燕 王国娟 孙珏 范忠泽

    大肠癌是世界各国恶性肿瘤中的主要死亡原因之一，在中国，大肠癌的死亡率位居癌症死亡率的第4、5位[1]，而发达地区其死亡率已上升到各种恶性肿瘤中的第3位，上海则已居第二位[2]。奥沙利铂是目前结肠癌的一线化疗用药,虽然奥沙利铂对许多耐顺铂或卡铂的肿瘤细胞仍抑制作用，并且在抗癌活性及毒副反应方面表现出明显的优势，但奥沙利铂耐药问题也成为影响临床疗效的一大难题[3]。笔者的前期研究表明，具有健脾化湿解毒功效的上海中医药大学附属普陀医院制剂肠胃清方可明显提高晚期胃肠道肿瘤患者以铂类为基础的化疗的疗效，明显改善生存质量，延长中位生存期[4,5]。应用笔者所在的课题组建立的奥结肠癌耐药细胞株HCT 116/L-OHP及其亲本株HCT 116进行实验，体外实验研究表明，肠胃清药物血清可通过影响DNA损伤修复途径，提高奥沙利铂抑制肿瘤细胞增殖的效果[6]。本研究在上述工作的基础上，建立HCT 116及HCT 116/L-OHP结肠癌皮下移植瘤模型，进一步观察中药复方肠胃清煎剂对L-OHP抑瘤的增效作用。

    1 材料与方法

    1.1 细胞系及实验动物

    人结肠癌细胞株HCT 116，购于南京凯基生物公司。HCT 116/L-OHP为本实验室自行诱导，对L-OHP耐药倍数达17.00倍。BALB/c裸小鼠80只，4～6周龄，体重(20±2)g，雌雄各半。购自于上海西普尔-必凯实验动物有限公司[生产许可证号为SCXK (沪) 2003-0002]，饲养于上海中医药大学附属普陀医院动物房SPF级动物实验室[动物实验室许可证号为SYXK (沪) 2005-0008]，自由饮食。

    1.2 主要试剂及仪器

    CELL 240型二氧化碳恒温培养箱(德国贺利氏公司)；倒置显微镜(日本Olympus公司)；101-2干燥箱(上海市实验仪器总厂)；95%乙醇(分析纯)(上海振兴化工厂)；奥沙利铂(江苏恒瑞医药股份有限公司)；乙二醇双乙胺醚-N，N’-四乙酸(EDTA)(Sigma公司)。

    1.3 中药制备

    肠胃清煎剂：由生黄芪30 g、党参15 g、生白术15 g、猪苓24 g、薏苡仁30 g、八月札24 g、野葡萄藤30 g、红藤30 g组成。由上海中医药大学附属普陀医院制剂室熬制成水煎剂，参照人与小鼠等效剂量换算公式，小鼠剂量约合25 g/kg，高剂量组为50 g/kg。煎煮方法：加水浸泡1小时，水煎2次 ......