李美妮 韩蕊莲 韩建萍 姚辉 罗焜 宋经元

    大黄Radix et Rhizoma Rhei为蓼科植物掌叶大黄RheumpalmatumL.、唐古特大黄RheumtanguticumMaxim.ex Balf.或药用大黄RheumofficinaleBaill.的干燥根及根茎[1]。掌叶大黄及唐古特大黄商品习称西大黄；药用大黄商品习称雅黄、南大黄。大黄具有泻肠通便、凉血解毒、逐瘀通经的功效。大黄为常用中药，用量较大，当药源供不应求时，有些地方用土大黄代替大黄使用[2]，这就影响了大黄准确、安全的临床效用。土大黄为蓼科植物钝叶酸模RumexobtusifoliusL.、羊蹄RumexjaponicusHoutt.、尼泊尔酸模RumexnepalensisSpreng、网果酸模RumexchalepensisMill.和巴天酸模RumexpatientisL.的根及根茎[3]。土大黄具有止血、清热解毒和消肿的功效。以往的研究已经从来源、性状、显微、理化、功能及主治等几方面对大黄和土大黄进行了鉴别[4]。另外，《中国药典》记载的药材虎杖的原植物蓼科植物虎杖PolygonumcuspidatumSieb. et Zucc.与大黄也常常容易被混淆。虎杖具有祛风利湿、散瘀定痛、祛痰的功效。

    植物DNA条形码就是利用一个或少数几个标准的DNA片段快速、准确识别和鉴定植物种类[5],已成为近年来生物分类学研究的热点之一和物种鉴定的一种有力工具。自陈士林等和Yao等[6，7]提出ITS2序列可以作为药用植物乃至植物潜在的候选条形码以来，对于不同科属如蔷薇科、大戟科、菊科、豆科、芸香科、景天属、黄芪属、重楼属、豆蔻属[8-16]，该序列均能成功鉴定相关近缘物种，而且在中药及其混伪品鉴定中显示了极大的应用前景，如筋骨草、砂仁、金钱草、京大戟、党参、藁本、小茴香、威灵仙、大青叶、赤芍、高良姜、垂盆草[13，17-27]。ITS2序列短，一般为200 bp左右，容易被成功扩增和测序，甚至对一些降解的药材及粉末也能进行分析。实验研究所需材料少，结果不受环境因素及物种发育阶段的影响，对于形态学上难鉴定的密切相关种具有鉴定准确的优势。宋经元等[28]已经用trnH-psbA序列成功区分开了包括大黄、虎杖在内的蓼科18个物种，本文拟用已经被广泛使用的ITS2序列对中药大黄与其混伪品土大黄、虎杖原植物进行鉴定。

    1 材料与方法

    1.1 材料来源

    材料来源如表1所示 ......