冯婷 李峰 宋月晗 刘晓兰 马捷 毛萌 吴凤芝 刘晶

    睡眠的作用是调节丘脑—皮层以及海马—新皮质网络神经元之间同步化作用，可以根据神经元的活动性来促进不同程度的突触效应，将短时记忆碎片再次激活、分析，并逐渐组合，融合成长时程记忆。不同时间的睡眠剥夺对学习记忆有不同程度的影响，对动物进行中长期睡眠剥夺能显著造成学习记忆障碍，脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)作为第二个被发现的神经营养因子也参与长时程增强的产生和维持。本实验通过疏肝补肾方药干预睡眠剥夺造成学习记忆障碍，观察BDNF的蛋白表达，研究疏肝补肾法的作用机理。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与分组

    成年雄性SD大鼠36只，清洁级，体重(270±20)g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号为SCXK(京)2006-0009。饲养于室内温度(22±2)℃、相对湿度在30%～40%的动物房，光照节律12L∶12D(6∶00～18∶00)，适应性饲养3天，期间自由饮水、进食，同时进行站平台训练。随机将大鼠分为3组，每组12只，分别为对照组(正常环境饲养)、模型组(睡眠剥夺)、疏肝补肾治疗组(模型组基础上给予四逆散和生慧汤合方)。

    1.2 动物模型制备

    采用改良的多平台(MMPM)睡眠剥夺法[1]复制模型，将模型组和疏肝补肾治疗组从造模第1天早8∶00开始放入睡眠剥夺箱，连续7天，至第8天早8∶00结束。使用自制睡眠剥夺箱，规格110 cm(长)×60 cm(宽)×40 cm(高)，塑料箱内壁为灰色，其底面均匀固定15个直径6.5 cm、高8 cm的有机玻璃平台。造模开始前在箱内注水，水平面应在平台下1 cm处，水温保持在28～30℃。箱顶置铁丝网，大鼠在平台间可自由活动和饮食。

    1.3 药物制备与给药方法

    疏肝补肾治疗组采用四逆散和生慧汤的1∶1合方。四逆散：选用《伤寒论》的四逆散(由柴胡、枳实、赤芍、炙甘草各6 g组成)；生慧汤：选用《辨证录·健忘门》的生慧汤(由熟地黄30 g、远志6 g、山茱萸12 g、柏子仁15 g、菖蒲1.5 g、炒枣仁15 g、茯苓9 g、红参9 g、白芥子6 g组成) ......