杨铂 刘靓雯 王小利 袁成民 安勇

    中医药对于抗结核药引起的药物性肝炎有较好临床疗效，但是由于体外实验研究模型不稳定，深入的疗效机制研究少见。本实验建立了异烟肼致人肝癌细胞株(human hepatocellular carcinoma cell lines，HepG2)细胞坏死和凋亡的细胞模型，制备解毒护肝饮药物血清干预，旨在发现其抗肝细胞损伤的疗效并分析其形成机制。

    1 材料与方法

    1.1 仪器与试剂

    RPMI1640培养液(美国GBCO公司)；小牛血清(美国GBCO公司)；流式细胞仪(双激光、六色)[美国BD公司(FACS Canto)]；FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit(BD Biosciences)；FITC CD95(20 μl/test)及溶血素(BD公司)；PE anti-human CD95 Ligand(5 μl/test)(eBioscience公司)；异烟肼注射液(天津金耀氨基酸有限公司，批号：0809162，规格：100 mg/2 ml)；HepG2细胞株(山东省医学科学研究院孟红教授赠)。

    1.2 药物血清的制备

    1.2.1 动物 雄性wistar大鼠15只，山东大学实验动物中心提供，(200±20)g，许可证号：SCXK(鲁)20090001，NO：0009272。环境：山东省中医药研究院动物实验中心，SPF级，许可证号：SYXK(鲁)20050052。

    1.2.2 药物 茵陈30 g、生甘草15 g、赤芍15 g、大黄6 g、栀子10 g、生地黄10 g、枸杞15 g、郁金10 g、白茅根15 g、白术15 g、砂仁9 g。上述药物水煎浓缩混匀后配制成100 ml水混悬液，充分混匀后给药。相当于临床等效量的倍数计算：按人与大鼠体表面积换算法计算大鼠一日临床等效量[1]：150 g(成人一日量)×0.09/kg=13.5 g/kg。甘草酸二铵胶囊：同样计算方法，临床一日等效量150 mg×0.09/kg=13.5 mg/kg。

    1.2.3 方法 随机分为正常组、甘草酸二铵胶囊组、中药组 ......