王华 陈泽涛

    缺血性卒中有发病率高、病死率高、致残率高、复发率高的特点，目前在对神经细胞营养修复方面无切实可行的中西药物，笔者通过多年的临床观察，研制出滋肾通络方治疗本病，取得明显的效果。

    脑源性神经营养因子(brain derived neurophic factor，BDNF)是在脑内合成的一种蛋白质，它广泛分布于中枢神经系统内，BDNF为一种碱性蛋白质，对神经元的存活、分化、生长发育起重要作用；并具有调节突触可塑性和神经递质传递等功能；同时，能防止神经元受损伤死亡、改善神经元的病理状态、促进受损伤神经元再生及分化等生物效应。本实验通过免疫组织化学法观察局灶性脑缺血大鼠(MCAO)治疗后脑组织BDNF的蛋白含量，以判断滋肾通络方对缺血周围区神经细胞损伤修复的作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SPF级健康Wistar雄性大鼠，体重250～300克，由山东大学动物实验中心提供，许可证号SCXK鲁20030004。摄食饲料为山东大学动物实验中心提供的混合饲料，实验期间自由饮水，室温18～25 ℃，相对湿度62%～72%。

    1.2 方法

    1.2.1 MCAO模型大鼠的制备 参照Zea-Longa[1]报道的颈外动脉栓线法制备局灶性大鼠脑缺血模型。Wistar雄性大鼠用1%戊巴比妥钠45 mg/kg行腹腔注射麻醉，并取仰位固定；剪去大鼠颈部毛发后，常规碘伏消毒颈部皮肤，沿颈部正中切开，钝性分离皮下组织，从两侧颌下腺之间剪开浅筋膜，暴露左侧胸锁乳突肌，钝性分离胸锁乳突肌与胸骨舌肌之间的肌间隙，暴露左侧颈总动脉(CCA)，沿此间隙继续向上方分离，找到CCA分叉，在颈总动脉深面穿一细线，钝性分离颈内、外动脉。提起该侧CCA，在接近颈内动脉(ICA)与颈外动脉(ECA)分叉处，用眼科剪小心在CCA剪一约0.2 mm的横切口，将一直径约0.2 mm的鱼钩线(尼龙线) ......