王晓娟

    丹参多酚酸盐(salvianolate)为丹参的水提物，其主要成分为丹参乙酸镁(magnesium lithospermate B)。文献报道[1-2]丹参多酚酸盐对缺血性疾病有明显的疗效，对人血管内皮细胞有促迁移及增殖的作用。骨折的愈合一直是学者们长期研究的难题[3]。骨折愈合过程中，骨折端新生血管的长入是其重要的步骤之一[4-5]，干细胞的归巢是骨折修复的重要来源[6-7]。如果提高干细胞的促新生血管形成能力，将大大提高骨折的愈合能力。本研究采用细胞共培养的方法，观察丹参多酚酸盐对骨髓间充质干细胞的增殖及与血管形成密切相关的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的表达情况，初步探讨中药对促骨折愈合的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    SD 大鼠骨髓间充质干细胞(赛业生物科技有限公司，广州，中国);DMEM 培养基(赛业生物科技有限公司，广州，中国);胎牛血清(FBS)(杭州四季青生物公司);丹参多酚酸盐(上海绿谷生医药有限公司，国药准字Z20050246);VEGF 及GAPDH 引物均购自上海生物工程有限公司;TRIzol(Invitogen 公司，加利福尼亚，美国)，ReverTra Ace qPCR RT Master Mix(TOYOBO Life Science，东京，日本);SYBR?Green Real time PCR master Mix-Plus(TOYOBO Life Science，东京，日本)。

    1.2 仪器与设备

    二氧化碳培养箱(型号DH-801 上海三腾仪器有限公司，上海，中国);酶联免疫检测仪(型号RJ17DG5033A 中西集团，辽宁沈阳，中国);紫外分光光度计(Beckman DU530 Germany);StepOneTMReal-Time PCR System(Applied Biosystems Company，Carlsbad ......