王嘉麟 刘雪梅 邢佳 王椿野 贺立娟 朱晓晨 郭蓉娟 李乐啸 耿东 李麒豫 史华伟 刘旭 张允岭

    基于火毒病机研究急性脑梗死重症大鼠皮层的核转录因子κB、c-fos蛋白表达及中药干预效应

    王嘉麟 刘雪梅 邢佳 王椿野 贺立娟 朱晓晨 郭蓉娟 李乐啸 耿东 李麒豫 史华伟 刘旭 张允岭

    目的基于“火毒”病机观察急性脑梗死重症大鼠皮层的核转录因子κB(NF-κB)、c-fos蛋白表达及中药干预效应。方法以Longa的方法略作改良制作鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌注模型，选择Bederson评分>2分的重症急性脑梗死大鼠，对照单纯扶正方药及单纯解毒方药，观察扶正解毒方药对急性脑梗死重症大鼠的宏观表征、NF-κB、c-fos蛋白表达的影响。结果(1)假手术组脑组织细胞核明显呈淡淡的浅棕黄色，模型各组细胞核着色呈现明显的棕黄色，以缺血24小时～48小时为主要变化，给予扶正药、解毒药和扶正解毒药后，神经核着色较浅，其中以扶正解毒药改善效果较为明显，各药物组着色仍比假手术组明显。脑组织细胞浆呈现相同趋势；(2)缺血各模型组大鼠，缺血侧c-fos和NF-κB蛋白表达明显高于假手术组(P1 材料与方法

    1.1实验动物及分组

    健康雄性SPF级Sprague Dawley(SD)120只大鼠[批号：SCXK(京)2012-0001]，体重(180±20)g。按照随机数字表法分为5组：假手术组、模型组、解毒组、扶正组、扶正解毒组，每组24只。各组再根据脑梗死时间随机分为6小时、24小时、48小时、72小时四个亚组，每个亚组6只。

    1.2动物模型建立

    以Zea Longa的方法[4]略作改良制作鼠左侧大脑中动脉阻塞模型，按Bederson评分方法判定模型成功，具体如下：

    SD大鼠采用10%水合氯醛(35 mg/kg)腹腔注射进行麻醉，麻醉后仰卧固定于手术台上，颈部正中切开，逐层分离组织，暴露左侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉，永久结扎颈总动脉近心端、颈外动脉根部，微动脉夹暂时夹闭颈总动脉的远心端，在颈总动脉结扎处远心端剪一斜口，经此斜口插入顶端光滑成球面的直径0.24 mm的尼龙线，经颈总动脉分叉处通过颈内动脉入颅至大脑前动脉的起始部，从而闭塞了大脑中动脉的起始部，造成了大脑中动脉供血相关区的梗死。尼龙线平均插入深度为(18.5±0.5)mm，结扎颈总动脉远心端以固定尼龙线和防止出血，逐层缝合皮肤，尼龙线末端暴露在体外。假手术组除插线10 mm外，其余步骤同模型组。

    观察动物术后整体状况并按Bederson等的方法对动物进行神经症状体征评分 ......