钟建 李夏露

    ·论著·

    益肾活血通络法对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏缺氧诱导因子—血管内皮生长因子信号通路干预作用的实验研究

    钟建 李夏露

    目的探讨缺氧诱导因子α(hypoxia-inducible factor α，HIF-α)诱导血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的作用机制及微血管损伤发生的机制及“益肾活血通络法”干预效果，为中医药治疗肾间质纤维化提供新的依据。方法实验采用单侧输尿管梗阻(unilateral urethral obstruction，UUO)造成肾纤维化动物模型，并以益肾活血方、氯沙坦灌胃对其进行治疗性干预，分别在术后第7天、14天、21天采集肾脏标本，运用免疫组化法检测HIF-α、VEGF在肾脏中的分布、表达。结果与假手术组比较，模型组、治疗组在各时间点HIF-α、VEGF表达均显著上调(P1 实验材料

    1.1 动物与分组

    雄性成年远交群(sprague dawley，SD)大鼠96只，体重180～250 g，随机分为假手术组、单侧输尿管梗阻(unilateral urethral obstruction,UUO)模型组、氯沙坦治疗组、益肾活血方治疗组各8只，各组观察时间点均为术后7天、14天、21天。UUO模型组、益肾活血方组、氯沙坦组大鼠左侧输尿管取肾门处和输尿管中上1/3处结扎，造成单侧输尿管梗阻模型，假手术组仅简单分离单侧输尿管后行腹部缝合。治疗组大鼠晨间分别予灌胃处理直至处死。其余各组予正常饮食饮水直至处死。

    1.2 药物与试剂

    益肾活血方：由黄芪15 g、当归15 g、丹参15 g、红花15 g、大黄15 g、三七15 g组成，由广西中医药大学第一附属医院药剂科提供。先将药材用相当于药材5倍的自来水浸泡2小时，煮沸后再微火煎煮30分钟，过滤后收集煎液，原药渣加少量水煎煮，得二煎液。两煎液混合，于水浴恒温器上浓缩至浓度为每毫升药液含生药1 g。

    氯沙坦：即科素亚，由北京诺华制药有限公司生产，批准文号：H20040217。每片50 mg，研磨成粉末，以蒸馏水配成浓度为5 mg/ml溶液备用。

    从大鼠术后第一天开始晨间分别予氯沙坦、益肾活血方灌胃给药，按照《实验动物学》中人与SD大鼠用药换算公式，氯沙坦、益肾活血方均采用10 ml/kg·d，1次/天，每天晨间经灌胃给药，自术后第1天开始至大鼠处死当天结束。

    2 实验方法

    2.1 大鼠体重、肾脏重量观察 ......