焦艳 李喆 刘清新 于永军

    ·论著·

    麦冬酒制前后对内皮细胞缺氧保护作用的比较研究

    焦艳 李喆 刘清新 于永军

    目的研究中药麦冬及其酒制炮制品对人脐静脉内皮细胞(EAHY926) 缺氧损伤的保护作用。方法体外培养EAHY926，采用通入缺氧气体建立缺氧损伤模型。用麦冬提取液干预后，采用MTT比色法测定细胞活力、黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶活性、硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛含量、硝酸还原酶法测定一氧化氮含量。结果组间比较采用单因素方差分析，两两之间用SNK检验。与模型组相比，川麦冬生品提取液组、酒制川麦冬提取液组、杭麦冬生品提取液组、酒制杭麦冬提取液组均能显著提高细胞活力(P1 材料

    1.1 药材

    所用药材生品川麦冬、杭麦冬购于沧州同仁堂药店，经过本校药学系天然药物教研室于永军副教授鉴定为正品，其中酒制品麦冬为于永军老师按麦冬：黄酒(1∶5)制备得到。

    1.2 药物提取

    分别取川麦冬、杭麦冬及其它们的酒制炮制品，采用水提法进行提取，加水量为药材的3倍，提取时间为1.5小时，浸膏进行低温干燥，得到的粉末(过三号筛)约5.0 g，精密称定，置50 ml容量瓶中，加70%D-Hank’s试液至刻度，冷浸24小时，期间振摇数次，0.22 μm微孔滤膜滤过，即得样品溶液。

    1.3 主要试剂与仪器

    RPMI-1640培养基(GIBCO，USA)(每升含10%小牛血清、L-谷氨酰胺0.33 mg、青霉素100 U、链霉素100 U、pH 7.4)；胰蛋白酶(MERCK,USA)；96孔细胞培养板(Costar，Denmark)；细胞培养箱(NAPCO，USA)；一氧化氮(NO)测试盒(批号20121102)，丙二醛(molondialdehtde,MDA)试剂盒(批号20121218)，超氧物歧化酶(superoxide dismutuse,SOD)试剂盒(批号20121122)，均购自南京建成生物工程研究所。四氮唑蓝(MTT)购自美国Sigma公司。

    1.4 实验细胞

    人脐静脉内皮细胞(EAHY926)株(购自天津后勤学院)接种于无菌培养瓶中 ......