郭云霞 李绍旦 刘毅 杨明会

    ·论著·

    补肾活血颗粒对帕金森大鼠脑腺苷A2A受体影响的研究

    郭云霞 李绍旦 刘毅 杨明会

    目的探讨补肾活血颗粒治疗帕金森病的作用机制。方法用6-羟基多巴损毁脑右侧内侧前脑束的方法建立帕金森大鼠模型。将33只SD模型大鼠随机分为治疗组18只和对照组15只，另设正常组15只，治疗组以中药补肾活血颗粒灌胃每日1次，连续8周。对照组及正常组同法以生理盐水灌胃8周，灌胃结束、观察帕金森大鼠旋转行为变化，后断头取脑，免疫荧光法观察大鼠脑腺苷A2A受体变化。结果治疗组大鼠旋转行为较对照组改善，治疗组大鼠脑纹状体A2A受体表达较对照组明显减弱(P1 材料与方法

    1.1 动物

    SPF级Sprague-Dawle(SD)雄性大鼠80只，体重190～210g左右，北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号：SCXK(京)2012-0001。

    1.2 药物与试剂

    补肾活血颗粒由山茱萸20 g、肉苁蓉10 g、何首乌15 g、川芎10 g、当归10 g、丹参15 g、蜈蚣2条等组成，解放军总医院、全军中医研究所统一制成中药颗粒冲剂，规格为一袋8 g，产品批号100101。

    6%水合氯醛(北京化学试剂公司)，6-羟多巴(6-OHDA)(美国sigma公司)，阿朴吗啡(沈阳第一制药厂)。

    1.3 仪器

    大鼠脑立体定位仪(美国KOPF公司)，帕金森动物旋转检测仪(美国columbus instruments公司)微量注射泵，牙科钻，外科手术器械，电子天平，超净工作台。

    1.4 模型制备

    80只大鼠随机分为2组，模型组65只，正常组15只，模型组随机分为造模组50只，假手术组15只，适应环境、正常饲养2周，行为学测试无旋转行为后造模。术前12小时禁食，按照动物使用的3R原则[1]予人道关怀，称重，6%水合氯醛(350 mg/kg)腹腔内注射，麻醉后，俯卧位固定于脑立体定位仪上，头部消毒，沿正中矢状线暴露颅骨，调整门齿杆，使前后囟位于同一水平面上，按照包氏大鼠立体定位图谱[2]定位右侧内侧前脑束(MFB)，于前囟后4.3 mm，矢状线右旁开1.5 mm，进针深度7.6 mm，牙科钻钻透颅骨，微量注射泵吸取6-hydroxydopamine(6-OHDA)8 μl，注射速度为1 μl/min，每次注射后留针5分钟，缓慢出针，缝合头皮。假手术组以等量生理盐水进行上述操作，正常组不做任何处理。

    术后2周进行旋转行为测试 ......