鄢泽然 张青 王潇慧 王越 聂莉媛 刘金民

    难治性癫痫对多种抗癫痫药物交叉耐药，其可能的机制是血脑屏障上表达增加的多药转运体逆浓度梯度将抗癫痫药物分子泵出血脑屏障，降低病灶处的药物浓度，使药物疗效降低甚至失效，引起癫痫反复发作。长期使用抗癫痫药物和癫痫反复发作均可增加多药转运体的表达。抑制血脑屏障上多药转运体的表达可能提高难治性癫痫的疗效。

    乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein，BCRP)属于三磷酸腺苷依赖性膜转运蛋白超家族成员，广泛分布在脑微血管、小肠、肝脏、胎盘等组织和器官中[1]，与药物的吸收、分布和代谢有密切关系。脑微血管内皮细胞上过度表达的BCRP可降低透过血脑屏障的抗癫痫药物浓度。故在血脑屏障结构和功能完整的前提下，抑制BCRP 的表达可以增加抗癫痫药物在脑组织中的浓度，对难治性癫痫的治疗有重要意义。

    柴贝止痫汤是刘金民教授在《医学心悟》“定痫丸”的基础上，继承、吸收王永炎院士临床经验化裁而成，全方由柴胡、浙贝母、法半夏、天麻、石菖蒲、牡蛎、地龙七味药物组成，主要功效是疏肝解郁，理气化痰，开窍定痫。临床应用发现，在抗癫痫药物治疗的基础上添加中药柴贝止痫汤可以抑制难治性癫痫患者的痫性发作，减少发作频次，减轻发作程度，其疗效优于单用抗癫痫药，因此推测其机制可能与二者协同增效有关。为探索柴贝止痫汤增敏抗癫痫药物的机制，本研究拟采用地塞米松孵育大鼠脑微血管内皮细胞建立BCRP 高表达模型，观察中药柴贝止痫汤对BCRP 及BCRP 可能的调节因子核因子κB(nuclear factor-kappa B，NF-κB)p65 表达的影响。

    1 材料与方法

    1.1 动物

    每批原代脑微血管内皮细胞需要SPF 级雄性Wistar 大鼠5 只，体重60～80 g，购自军事医学科学院实验动物中心。动物许可证号:SCXK-(军)2012-0004;出笼单号:0000770、0001240。

    1.2 主要试剂

    DMEM 高糖培养基(Gibco，12100-038)，胎牛血清(Gibco，10099-141)，II 型胶原酶(Sigma，C6885)，0.25%胰酶(含乙二胺四乙酸)(Sigma，T4049)，L-谷氨酰胺(Sigma，G6392)，噻唑蓝(methyl thiazolyl diphenyl-tetrazolium bromide，MTT)(Sigma，M5655)，A 型明胶(Sigma，G2625) ......