周盛楠 高彦彬 李娇阳 邹大威 朱智耀 张娜 王馨瑶 李光超 崔方强 刘静

    糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病发展过程中最常见的慢性微血管并发症之一。据世界卫生组织统计，截止2013年10月全球有3.47 亿人患有糖尿病。据统计，25%～40%的糖尿病患者伴随糖尿病肾病。在西方国家，糖尿病肾病是导致终末期肾病的主要原因[1]。由于DN 发病机制尚未完全阐明，目前尚无有效药物阻止DN 患者肾功能的进行性衰减，一旦发展至终末期肾病则需透析或肾移植治疗。因此，探求糖尿病肾病的发病机制，寻求有效的药物成为当前糖尿病学界及肾脏病学界研究的热点。临床及实验研究表明，DN 早期肾小球高灌注、高压力、高滤过状态可导致肾小球肥大，并与肾小球超微结构的改变密切相关[2-3]。引起肾小球高灌注、高压力、高滤过的机制尚未阐明，目前研究认为内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)蛋白表达增强引起的一氧化氮(nitric oxid，NO)生成增多参与DN 早期肾小球肥大及肾小球高滤过的发展过程[4]。本课题采用高脂饲料联合链脲佐菌素建立早期DN 大鼠模型，通过检测肾组织中NO 含量及eNOS 蛋白的表达，探讨中药通心络治疗糖尿病肾病的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 动物

    SPF 级8 周龄雄性SD 大鼠40 只，体重180～220 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，动物合格证号:SCXK(京)2012-0001。

    1.2 药品

    通心络超微粉(主药为人参、赤芍、大枣、檀香、降香、水蛭、全蝎、土鳖虫、蜈蚣、蝉蜕、乳香、冰片等)，产品批号:20130108，河北以岭医药研究院有限公司;缬沙坦胶囊(商品名:代文，规格:80 mg/粒，产品批号:X1448，批准文号:国药准字H20040217，北京诺华制药有限公司)

    1.3 主要试剂

    Sigma 链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)，货号:SO130-1g，购自北京首医临床技术中心;柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液(0.1 M，pH=4.4，购自北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司);大鼠尿微量白蛋白酶联免疫试剂盒(批号:19，购自北京欣博盛生物科技有限公司);NO 检测试剂盒(批号:A012，南京建成科技有限公司);肌酐测定试剂盒(批号:4501-40-2013，上海科华生物工程有限公司);大鼠尿素氮试剂盒(批号:4217-39-2013 ......