希望I号液对大鼠吸入臭氧肺损伤的保护作用研究
肺泡,显著性,1材料与方法,1试药,2动物,3仪器与试剂,4动物分组及模型建立,5血清中SOD,LPO,CAT,GSH-Px检测,6肺组织病理学观察检测,7免疫组化检测肺组织SP-A含量,8统计学分析,2结果,1希
张微 刘甜甜 祖承哲 彭金娥 冯丽莉 王湘 张燕 蔡大勇 王玥琦臭氧在全球和区域大气环境变化中扮演着重要角色,作为城市污染大气中的重要污染物,引发很强的环境效应[1]。而且,臭氧还会跟其他污染物联合作用,臭氧加强PM 2.5 对人体的危害[2]。希望Ⅰ号液由中药枸杞子和大枣组成,二者均有抗氧化增强免疫力的作用[3-4],但未出现其防治臭氧损伤的报道。本研究采用大鼠吸入臭氧模型,灌胃给予希望I 号液,观察希望Ⅰ号液对臭氧所致肺损伤的保护功能。
1 材料与方法
1.1 试药
希望I 号液由枸杞子11 g、大枣6 g 组成(出自《太平圣惠方》枸杞子散)生药饮片均购自北京同仁堂药店,由北京中医药大学基础医学院中医药基础理论与关键技术中心配制;维生素E(Vitimin E,VE)软胶囊(生产批号:20130104)由青岛双鲸药业有限公司生产。
1.2 动物
健康成年SD 雄性大鼠48 只,体质量220 ~253 g[北京维通利华公司,实验动物使用许可证号:SCXK(京)2012-0001]。
1.3 仪器与试剂
臭氧发生器(山东精工好医生仪器有限公司);超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)(生产批号:20130406)、过氧化脂质(lipid peroxide,LPO)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、测定试剂盒(批号:20140522)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)(生产批号:20130326)均购自南京建成生物工程研究所;肺表面活性蛋白-A(surfactant protein A,SP-A)抗体购自santacurz 公司;羊抗兔链霉亲和素-生物素复合物(strept avidin-biotin complex,SABC)免疫组化试剂盒购于武汉博士徳公司。
1.4 动物分组及模型建立
48 只雄性SD 大鼠,随机分为6 组,即对照组、模型组、维生素E 组、希望I 号液低、中、高剂量组各8 只。
除对照组外,其余各组都放入自制臭氧染毒柜中暴露臭氧(1.2 ±0.2 ppm)。所有老鼠自由饮食饮水。灌胃剂量:维生素E 组为0.0135 g/kg,希望I号液低、中、高剂量组为0.045、0.090、0.180 g/kg,臭氧造模同时给药。45 天结束造模,处死各组动物。
1.5 血清中SOD、LPO、CAT、GSH-Px 检测 ......
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