窦永起 陈慧彬 陈超

    细胞周期调控异常与肿瘤的发生和发展的关系密切，中医药在治疗肺癌的过程中显著提高了治疗的有效率和患者的临床获益率、疾病稳定率，显著延长肿瘤进展时间[1]。自拟扶正散结汤是临床经验方，经多年临床实践证明，在稳定肺癌病灶、延缓肿瘤复发转移及延长患者生存期等方面均有一定疗效。为探讨其作用机制，本研究采用小鼠lewis肺癌移植瘤模型，观察其拆方配伍中药对肿瘤生长、组织病理、细胞周期和凋亡的影响。

    1 材料和方法

    1.1 实验动物

    SPF级C57BL/6小鼠90只，雄性6～8周龄，体质重18～22 g，初进动物时间:2013年7月26日，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供，动物合格证号:SCXK(军)2012-0004。其中10只用于移植瘤细胞传代，70只建立小鼠皮下移植瘤动物模型，另外10只小鼠作为空白组，用于一般情况观察、对比及排除小鼠非正常死亡情况。

    1.2 瘤株

    Lewis Lung Cancer瘤株由军事医学科学院六所馈赠。

    1.3 试剂及仪器

    顺氯氨铂，齐鲁制药公司生产(批号:2030111DB)，核糖核酸酶(RNase A)(批号:SLBD3952V)由Sigma公司生产;流式细胞仪(Cytomics FC 500，Beckman Coulter)。

    1.4 分组及小鼠Lewis肺癌移植瘤模型制备

    SPF级C57BL/6小鼠90只，其中10只用于移植瘤细胞传代，其余80只随机分为:空白组、模型组、顺氯氨铂组、益气扶正组(简称扶正组)、化痰散结组(简称化痰组)、活血化瘀组(简称活血组)、清热解毒组(简称解毒组)、中药联合组(简称联用组)，每组10只。按照文献方法制备小鼠Lewis移植瘤模型[2]。复苏Lewis肺癌瘤株，在无菌条件下接种于2只C57BL/6小鼠右腋窝皮下，10天后按无菌操作程序，脱颈处死小鼠，取生长良好肿瘤组织，用生理盐水洗净剪碎后加生理盐水用匀浆器研磨，台盼蓝染色计算活细胞数>95%，调整肿瘤细胞悬液浓度为1×107/mL瘤细胞继续皮下接种4只小鼠，每只接种0.l mL，如此传代3次 ......