白辰 车念聪 刘文兰 赵晖 司远

    肝纤维化(hepatic fibrosis，HF)是指以胶原纤维 为主的细胞外基质(extracellular matrix，ECM)在肝内大量沉积的病理过程[1]。与拮抗纤维化的西药相比，中药复方在对病人个体治疗方面具有一定优势。滋阴疏肝的时方一贯煎为临床常用治疗肝纤维化的方剂。本课题组前期实验研究表明[2]，一贯煎汤剂能有效降低血清转氨酶含量，减轻肝脏炎症程度。本研究拟通过建立CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型，观察经一贯煎汤剂干预后，肝组织细胞外I型胶原沉积情况的变化，探讨一贯煎汤剂对降解细胞外I型胶原沉积是否有促进作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及试剂

    选用健康Sprague-Dawley大鼠，雄性，体质量180～200 g，鼠龄8周，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号:SCXK(京)2012-0001，共28只，饲养在首都医科大学实验动物科学部SPF级动物室。

    一贯煎:根据原方药物剂量和比例[3]，选取北京同仁堂药店的标准中药材北沙参9 g、麦冬9 g、当归9 g、生地黄20 g、枸杞子12 g、川楝子4.5 g，煎煮为汤剂。按照体表面积计算，大鼠每100 g体质量所需生药为0.65 g，将一贯煎汤剂按照100 g大鼠灌胃1mL的体积配成相应浓缩液备用。

    CCl4(四氯化碳分析纯专用试剂，纯度≥99.5%，北京现代东方精细化学品有限公司，批号:20060132)，橄榄油(阿果萨特级初榨橄榄油，最大酸度0.4%，批号:14001952)，秋水仙碱(西双版纳版纳药业有限责任公司生产，批号:120412)，生理盐水(石家庄四药有限公司，批号:20729509)，蛋白定量试剂盒(北京蒂诺奥生物科技有限公司)，一抗:Anti-Collagen I antibody ab34710(美国 abcam)、蛋白质印迹法二抗:Dylight 800-goat anti-rabbit IgG(美国 Earthox LLC) ......