吴爱明 娄利霞 张冬梅 聂波 赵久丽 赵明镜

    ·论著·

    益气活血药对心肌梗死大鼠心脏蛋白激酶C表达的影响

    吴爱明 娄利霞 张冬梅 聂波 赵久丽 赵明镜

    目的 探讨益气活血中药(生脉注射液联合血塞通注射液)对心肌梗死大鼠心脏蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)表达的影响。方法 SD大鼠随机分为模型组、假手术组、卡托普利组和益气活血组。结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型(假手术组只穿线,不结扎)。模型组和假手术组给予生理盐水;卡托普利组给予卡托普利片4.39 mg/(kg·d)溶解灌胃;益气活血组给予生脉注射液3.51 mL/(kg·d)联合血塞通注射液17.54 mg/(kg·d)腹腔注射。治疗4周后取材,称重计算心脏质量指数;RT-PCR法检测左心室心肌组织PKC mRNA的表达;Western blot法检测PKC蛋白的表达。结果 与假手术组比较,模型组心脏质量指数显著增加(P<0.01),PKC的mRNA和蛋白表达亦显著增加(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,益气活血组和卡托普利组心脏质量指数显著降低(P<0.05),同时PKC的mRNA和蛋白表达也显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论 益气活血药(生脉注射液联合血塞通注射液)可以改善心脏重构,其机制与抑制心肌梗死后心肌组织PKC的高表达有关。

    心肌梗死; 心脏重构; 蛋白激酶C; 益气活血

    益气活血法是中医治疗缺血性心脏病的常用有效治法。特别在心肌梗死的治疗上,益气活血药应用广泛,对缓解症状和改善患者预后有益。本研究在益气活血法指导下,采用生脉注射液联合血塞通注射液对心肌梗死大鼠进行实验性干预,观察其对心脏质量指数和心肌组织蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)基因和蛋白表达的影响,旨在探讨益气活血中药治疗心肌梗死的分子机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SD大鼠,雄性,体质量(200±240)g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,许可证编号: SCXK(京)2006-0009。

    1.2 实验仪器

    小动物呼吸机、BL-420F生物机能实验系统、实时荧光定量PCR仪、电泳仪、垂直电泳槽和转膜仪。

    1.3 实验试剂

    SYBR Green PCR Master Mix为美国ABI公司产品;PKC一抗(生产批号:sc-10800,美国 Santa cruz公司产品);二抗为辣根酶标记山羊抗兔IgG (生产批号:ZB-2301,北京中杉金桥公司);三磷酸脱氧 核 糖 核 苷 混 合 物 (deoxy-ribonucleoside triphosphate Mix,dNTP Mix)、多聚胸腺嘧啶寡核苷酸引物[Oligo(dT)15Primer]、莫洛尼鼠白血病病毒反转录酶(M-MLV Reverse Transcriptase)均为美国Promega公司产品 ......