张庆 茹庆国 林红梅 刘艳 康倩 李辉 吴清

    中药当归为伞形科植物当归Angelica sinensis(Oliv.)Diels.的干燥根，有补血活血、调经止痛、润肠通便的功效[1]，广泛应用于中医临床，素有“十方九归”之称。当归挥发油是当归的主要有效成分之一，现代药理研究证明其有提高免疫力、消炎镇痛和抗血小板聚集等作用[2-3]。

    在本研究中，用分子蒸馏对超临界流体萃法取制备的当归挥发油进行进一步分馏，应用气质联用色谱(gas chromatography-mass spectroscopy，GC-MS)分析所得馏分的化学组成，用LPS诱导的RAW264.7细胞模型评价各馏分的抗炎作用，用PLSR分析各馏分中的化学成分与抗炎药效的相关性。本研究为当归及其他中药挥发油的进一步开发利用及中药挥发油质量控制提供了有价值的资料。

    1 材料

    1.1 材料与试剂

    当归饮片购自北京本草方源药业有限公司，经北京中医药大学中药学院中药鉴定系刘春生教授鉴定为伞形科植物当归的干燥根。提取前将当归饮片粉碎成粗粉。

    脂多糖，二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)购自Sigma-Aldrich公司;磷酸盐缓冲液(PBS)、青霉素—链霉素溶液、MTT试剂购自北京索来宝公司;NO试剂盒购自江苏碧云天生物科技研究所;DMEM培养基、色谱级乙酸乙酯购自Fisher公司。

    1.2 仪器与设备

    HA220-50-01超临界流体萃取仪(江苏南通华安超临界萃取有限公司)，BSA224S分析天平(赛多利斯科学仪器有限公司)，VLK-70分子蒸馏设备(德国瑞达有限公司)，Thermo Finnigan 2000 Trace DSQ气相色谱-质谱仪器(美国Thermo公司)，Multiskan GO多功能酶标仪(美国Thermo公司)。

    2 实验方法

    2.1 超临界流体萃取及分子蒸馏

    根据实验室前期已确定的最佳提取工艺对当归进行超临界流体萃取，以CO2为萃取溶剂。提取的工作条件如下:工作压力:30 MPa，工作温度:50℃，提取时间:2小时，CO2的流量:25 L/h;分离器Ⅰ的工作压力:8 MPa，温度:50℃;分离器Ⅱ的压力为提取系统尾部的压力，工作温度:35℃。

    用分子蒸馏设备对所得挥发油进行分馏，工作条件如下:刮刀的转速:300 rpm/min，分子蒸馏过程真空度:0.35 mbar ......