王永强 师一民 安辰 赵晖 李明 齐放 张秋霞 陈振振 樊永平 王蕾

    ·论著·

    补肾益髓方促进实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠髓鞘再生的作用

    王永强 师一民 安辰 赵晖 李明 齐放 张秋霞 陈振振 樊永平 王蕾

    目的 观察补肾益髓方促进实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)小鼠髓鞘再生的作用。方法 80只雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照、模型、醋酸泼尼松及补肾益髓方组。以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendroglia glycoprotein，MOG)35-55诱导小鼠EAE模型。治疗组小鼠每天给予相应药物灌胃治疗，共40天，醋酸泼尼松为阳性对照药物。每天观察动物的一般情况，记录小鼠神经功能评分，统计小鼠的发病率、潜伏期、病程和疾病负荷等。取小鼠脑和脊髓经固蓝染色观察其髓鞘变化，免疫组化法测定髓鞘再生相关蛋白硫酸软骨素蛋白多糖2胶质细胞和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein，MBP)的表达。结果 补肾益髓方能够延长小鼠发病潜伏期、缩短EAE病程、降低小鼠疾病负荷(P1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SPF级C57BL/6雌性小鼠，6～8周龄，体质量15～17 g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号：SCXK(京)2012-0001，饲养于首都医科大学实验动物中心国家标准实验室。置于独立通风系统单笼饲养，温度18～22℃，相对湿度40%～60%，自由饮食和饮水。所有实验步骤均经首都医科大学伦理委员会审核批准。

    1.2 药物和试剂

    补肾益髓方(生地黄10 g、熟地黄10 g、制何首乌10 g、酒大黄2 g、益母草10 g、浙贝母6 g、水蛭3 g、全蝎2 g、天麻3 g、连翘6 g)由北京亚东生物制药有限公司制备。制备方法简述如下：浙贝母研粉过筛；其余药物煎煮浓缩成稠膏，与浙贝母粉混匀备用。醋酸泼尼松片由天津力生制药有限公司生产。

    髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein，MOG)35-55由北京旭和源生物科技有限公司合成；灭活结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis，H37Ra，MTB，批号：4283842，购自BD公司)；完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant, CFA，批号：SLBH7316V，购自Sigma公司)；百日咳毒素(pertussis toxin ......