秦丽 窦永起 李敏 王毓国

    ·论著·

    益气活血中药黄芪-丹参对脂多糖致急性肺损伤大鼠防治作用的机制研究

    秦丽 窦永起 李敏 王毓国

    目的 观察益气活血中药黄芪-丹参对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)致急性肺损伤(acute lung injury, ALI)大鼠TLR-4/NF-κB信号通路的影响。方法 SD雄性大鼠40只，随机分成正常对照组、模型对照组、地塞米松组、益气活血中药组，各组10只；除正常对照组气管内滴注生理盐水，其余各组滴注LPS(5 mg/kg)制备ALI模型；造模前后各3天干预组予以2 mL相应药物(益气活血中药0.59 g/mL或地塞米松5 mg/kg)，其余组予以等量的生理盐水灌胃；于末次灌胃给药2小时后处死大鼠，免疫组织化学法检测大鼠肺组织中Toll样受体4(Toll-like receptor 4，TLR-4)、白介素1受体相关激酶1(interleukin-1 receptor-associated kinase-1，IRAK-1)、核转录因子κB(Nuclear factor kappa B，NF-κB)蛋白表达的含量，qPCR测定肺组织中TLR-4、IRAK-1、NF-κB mRNA表达量。结果 LPS造模组大鼠肺组织中TLR-4、IRAK-1、NF-κB mRNA表达和蛋白表达均高于正常对照组(P0.05)，而NF-κB mRNA表达和蛋白表达量高于地塞米松组(P1 材料与方法

    1.1 实验动物

    选用两月龄健康清洁级SD雄性大鼠40只，体质量为(200±20)g，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供，许可证号：SCXK(军)：2012-0004。大鼠在清洁动物房适应性饲养1周后进行试验，期间自由摄食、饮水，室温18～24℃，相对湿度40%～70%，每天12小时光照维持，昼夜循环。

    1.2 主要试剂

    LPS，Sigma公司，批号L2880；戊巴比妥钠，Germany公司，批号K2208；Rabbit Anti-TLR-4(批号：bs-1021R)、Rabbit Anti-IRAK-1(批号：bs-3194R)、Rabbit Anti-NF-κB/p65(批号：bs-20160R)、免疫组化试剂盒(批号：sp-0023)均购自北京博奥森生物技术有限公司，DAB显色试剂盒(中杉金桥，ZLI-9017)；RNApure超纯总RNA提取试剂盒(批号：70621562)、M-MLV Ⅲ First-Strand cDNA Synthesis Kit(批号：656666BB)、Green qPCR Master Mix(批号：706084XX)均购自博迈德生物有限公司 ......