陈明喆 何伟

    ·论著·

    橙皮苷对IgA肾病大鼠肾脏组织中TLR-4和NF-κB表达的影响研究

    陈明喆 何伟

    目的 研究橙皮苷对IgA 肾病大鼠肾脏组织中TLR-4和NF-κB表达的影响，探讨橙皮苷对肾脏是否有保护作用及其作用机理。方法 雄性SD大鼠60只随机分为正常组、模型组和橙皮苷治疗组，IgA模型建立成功后，橙皮苷治疗组给予橙皮苷10 mg/(kg·d)灌胃治疗，正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃，治疗4周后、8周后分别处死大鼠，检测其24小时尿蛋白、血尿素氮、血白蛋白、白介素-1(interleukin-1，IL-1)和白介素-6 (IL-6)，免疫组化、RT-PCR以及Western blot检测肾组织中TLR-4和NF-κB表达。结果 在整个实验过程中，正常组饮食正常，精神良好，模型组和橙皮苷治疗组在造模成功后表现有一定的食欲不振和精神萎靡，使用橙皮苷治疗后，上述情况有所缓解；与正常组相比，模型组24小时尿蛋白、血尿素氮、IL-1和IL-6明显升高(P1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 本次实验共购买SD大鼠60只，所有大鼠均购于华中科技大学同济医学院动物实验中心，大鼠体质量为180～200 g，所有大鼠购买后均给予定时定量饮水，同时勤换垫料的基础上适应性喂养2周，2周后开始构建IgA肾病模型。

    1.1.2 主要试剂和材料 本次药物橙皮苷购于湖北合天化工有限公司；造模用试剂牛血清蛋白(BSA)、脂多糖(LPS)以及四氯化碳(CCl4)购于中国国药公司；造模用花生油购于山东鲁花有限公司；造模用蓖麻油购于上海化学有限公司；TLR-4抗体，NF-κβ抗体购于英国abcam公司，总RNA提取试剂盒购于天根生物公司，引物合成由南京金斯瑞生物工程公司完成。

    1.2 动物模型的建立以及分组

    所有大鼠在造模前均给予一次检测血液肾功能，肾功能没有异常后开始分组和造模，60只大鼠采用随机原则分为正常对照组、模型对照组(IgA肾病组)，以及橙皮苷治疗组，每组为20只，模型对照组和橙皮苷治疗组在分组后即给予造模，造模按照经典方法进行[4]，首先每天给予1次牛血清蛋白灌胃，灌胃量为400 mg/(kg·d)，共灌胃10周；大鼠每周注射一次0.5 mL蓖麻油和0.1 mL四氯化碳，共9周；分别于第6周后、第8周后给予大鼠脂多糖0.05 mg尾静脉注射；为使实验准确，在造模时正常对照组每天给予等量的生理盐水灌胃，注射也为等量生理盐水，10周后，观察其造模成功，造模成功的判断标准为：可见明显血尿以及镜下检测可发现有30%的红细胞 ......