赵笛 赵丕文 武虹波 蔡欣悦 孙丽萍 陶仕英 牛建昭 卢迪 齐明月

    ·论著·

    二仙汤对顺铂所致大鼠卵巢早衰模型中卵巢颗粒细胞增殖及周期的影响

    赵笛 赵丕文 武虹波 蔡欣悦 孙丽萍 陶仕英 牛建昭 卢迪 齐明月

    目的 观察二仙汤对顺铂损伤大鼠卵巢颗粒细胞增殖及细胞周期的影响。方法以不同剂量的二仙汤药理血清作用于体外培养的顺铂损伤卵巢颗粒细胞，并以正常药理血清为空白对照，戊酸雌二醇药理血清为阳性对照，同时对比加入PI3K/AKT通路的抑制剂LY294002后各组的变化。MTT法检测各组药理血清作用于卵巢颗粒细胞24小时、48小时和72小时的增殖情况。流式细胞术检测各组中细胞周期各时相的变化。结果(1)二仙汤对顺铂损伤后的卵巢颗粒细胞具有增殖促进作用(P1 材料与方法

    1.1 材料

    实验动物：健康雌性SD大鼠，体质量50～70 g，清洁级，斯贝福实验技术有限公司提供，生产许可证号：SCXK(京)2016-0002。动物饲养在室温、自然光照的清洁级实验室内，食水充足。

    实验药物：二仙汤组成为仙茅10 g、淫羊藿15 g、巴戟天15 g、当归10 g、知母15 g、黄柏10 g，药材粉末购自北京东直门医院，应用时转化为药材饮片的质量，按本实验用大鼠质量(60 g)与成人标准体质量(60 kg)的折算系数折算出灌胃剂量(总生药材质量)即11.25 g/kg。顺铂，每支10 mg，由齐鲁制药有限公司生产，国药准字：H37021358。戊酸雌二醇(商品名：补佳乐)，购自中日友好医院，1 mg/片，拜耳医药有限公司生产，批号：195A5，用法与剂量：成人每日1 mg，折算成大鼠所需剂量即0.15 mg/kg。

    实验试剂和仪器：孕马血清促性腺激素(Prospec，批号：hor-272)、LY294002(MedChem Express，批号：HY-10108)、胎牛血清(Hyclone，南美洲)、DMEM/F-12培养基(Hyclone)、Hank’s平衡盐溶液(solaibio)、青霉素(solaibio)、链霉素(solaibio)、甲基四氮哇蓝(MTT，迈晨科技公司)，DMSO(ACS Grade)、碘化丙啶(Sigma)；HITACHI 20PR-52D 离心机(日本)、超净台(北京亚泰科隆实验科技开发中心)、倒置显微镜(NIKON TE200-S)，CO2培养箱(MCO-18AIC ......