彭麒朕 耿建国 邹大威 高彦彬 龚慕辛 吴晓明 尚雅文

    ·论著·

    糖肾宁对高糖培养的小鼠系膜细胞TGF-β1和P38MAPK表达的影响

    彭麒朕 耿建国 邹大威 高彦彬 龚慕辛 吴晓明 尚雅文

    目的 观察糖肾宁对高糖培养的小鼠系膜细胞转化生长因子-1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)和P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 mitogen activated protein kinases，P38MAPK)表达的影响。方法 以体外高糖培养的小鼠系膜细胞为研究对象，实验分为正常对照组、高糖培养组、高糖+缬沙坦组和高糖+糖肾宁高、中、低剂量组，使用大鼠含药血清给药分别处理24小时，用ELISA法检测细胞上清液中纤维连接蛋白(fibronectin，FN)的含量水平；运用Western Blot方法检测P-P38MAPK、环磷腺苷效应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein，CREB)、TGF-β1的蛋白水平。结果 与正常对照组比较，高糖培养组系膜细胞上清液中FN蛋白表达明显升高(P1 材料与方法

    1.1 实验细胞

    小鼠肾小球系膜细胞(SV40 MES 13)，中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心提供。

    1.2 实验动物

    8周龄SPF级雄性SD大鼠20只，体质量(250±20)g，均购自北京华阜康生物科技股份有限公司，动物合格证号：SCXK(京)2014-0004。

    1.3 实验药物

    糖肾宁(主要药物配比：黄芪4份、金樱子2份、川芎1份、大黄1份、葛根2份，由首都医科大学中医药学院中药制剂室制备成浸膏粉)；缬沙坦胶囊(商品名：代文，规格：80 mg/粒，批号X1448，北京诺华制药有限公司)。

    1.4 主要试剂

    Anti-p38 antibody [M138](abcam)，Anti-CREB antibody [E306](abcam)，Anti-p38(phospho T180+Y182) antibody [M139](abcam)，Anti-TGF beta 1 antibody(abcam)，(FN)ELISA Kit(Cusabio)，DMEM低糖(Gibco)，0.05%胰蛋白酶溶液/EDTA(Gibco)，BCA蛋白浓度测定试剂盒(北京鼎国昌盛)，胎牛血清(Hyclone)。

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