乔天阳 刘文兰 王文娟 王程 孟月

    一贯煎及骨髓间充质干细胞对肝纤维化大鼠阴虚证表征影响的实验研究

    乔天阳 刘文兰 王文娟 王程 孟月

    目的 观察骨髓间充质干细胞在一贯煎的作用下对肝纤维化大鼠阴虚证的影响并探讨该过程的发生机制。方法 将54只SD大鼠随机分为6组，即正常对照组、模型组、阳性对照组、骨髓干细胞组、骨髓干细胞一贯煎组及一贯煎治疗组。除正常对照组外，其他5组建立CCl4诱导的肝纤维化模型。造模停止第三天，骨髓干细胞组及骨髓干细胞一贯煎组经尾静脉注射骨髓间充质干细胞。一贯煎组及骨髓干细胞一贯煎组给予一贯煎浓缩液灌胃，模型组、正常组灌服生理盐水，阳性组给予秋水仙碱灌胃，每天一次，一共给药4周，给药期间每周测量大鼠体质量、体温、血流速度、饮水量。4周后取材，将pH试纸置于大鼠舌面20秒，测量前后重量变化，判定大鼠舌面干湿度；通过HE染色和马松染色评价肝脏炎症活动度和纤维化程度；通过苦味酸—天狼星红染色评判造模大鼠肝组织细胞胶原面积比；通过荧光示踪评判骨髓间充质干细胞在肝纤维化大鼠肝组织中的表达。结果 (1)一贯煎加骨髓间充质干细胞组的炎症活动度和纤维化程度明显低于模型组，差异有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 实验动物

    Sprague-Dawlay大鼠，雄性，体质量180～220 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号SCXK(京)2006-0008，共54只，饲养在首都医科大学实验动物科学部SPF级动物室，自由饮食，室温18～23℃，湿度为(20.0±3.0)%。

    1.2 药物及试剂

    一贯煎浓缩液：根据一贯煎原方药物剂量和比例，选取北京同仁堂药店的标准中药北沙参9 g、麦冬9 g、当归9 g、生地黄20 g、枸杞子12 g、川楝子4.5 g，将饮片置煎煮容器内，加相当于药材量5～7倍的冷水浸泡1～2小时，煮沸30分钟，过滤。药渣加3～5倍量水继续煎煮，煮沸20分钟，过滤。合并2次滤液。冷却装入灭菌药瓶，置4℃冰箱保存备用。

    CCl4分析纯专用试剂(纯度≥99.5%，北京现代东方精细化学品有限公司，批号：140611)；迈萨维诺特级初榨橄榄油(希腊艾美可油脂有限公司，批号：14015)，配成50%浓度；秋水仙碱(西双版纳版纳药业有限责任公司生产，批号：140521)，大鼠剂量依据成人用量的30倍(即0.25 mg/kg)，使用时以蒸馏水调制药液成0.025 g/L。

    1.3 仪器

    正置荧光显微镜(Leica DM4000B，德国) ......