马梦雨 杨晓燕 赵璐 梁芳 张勇 徐可 樊瀛哲 许建华

    ·论著·

    肝气郁结对结肠癌模型小鼠肝转移的影响

    马梦雨 杨晓燕 赵璐 梁芳 张勇 徐可 樊瀛哲 许建华

    目的 通过构建肝气郁结证模型，观察肝气郁结对结肠癌肝转移的影响并探讨β-AR信号通路在其中的作用机制。 方法 通过束缚制动法构建肝气郁结证模型，将BALB/C裸小鼠随机分为空白对照组、普萘洛尔对照组、ICI118,551 对照组、空白肝郁组、普萘洛尔肝郁组、ICI118,551 肝郁组，共六组，每组6只。ELISA法检测血清、脾种植瘤肾上腺素(epinephrine，E)、去甲肾上腺素(norepinephrine，NE)含量；qRT-PCR 和Western blot 法检测脾脏种植瘤组织转化生长因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)、白介素-6(interleukin-6，IL-6)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor ，VEGF) 和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein-9，MMP-9)表达情况；免疫组化法观察肝转移瘤组织VEGF和CD31蛋白表达情况。 结果 与空白对照组相比，空白肝郁组小鼠肝脏重量明显升高(P1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SPF级4周龄BALB/C裸小鼠，雄性，体重18～20 g，共38只，购自上海SLAC实验动物中心，合格证号：SCXK[沪]2012-0002。实验动物饲养在SPF及层流架中，环境温度(22±2)℃，照明时间12小时/天。

    1.2 实验药物与试剂

    盐酸普萘洛尔标准品(E4642，Sigma-Aldrich，美国)、ICI118,551((±)-1-[2,3-(二氢-7-甲基1H-茚-4-基)氧]-3-[(1-甲基乙基)氨基]-2-丁醇盐酸盐)(I127，Sigma，美国)； Anti-MMP9 antibody(ab119906)、Anti-VEGF antibody(ab1316)、Anti-IL-6 antibody(ab154367)、Anti-TGF-β antibody(ab28364)、Anti-CD31 antibody(ab31013)，均购自美国Abcam；FITC anti-mouse/human CD11bPE anti-mouse F4/80(123110、101206，BioLegand，美国)；Anti-GAPDH antibody(PB0141 ......