唐珑 王悦芬 赵文景 孙雪艳 崔方强 孟元 赵静 蔡朕 王晖 申子龙

    糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)早期的临床表现以微量白蛋白尿为主，研究证明蛋白尿不仅是肾小球足细胞功能紊乱的结果，也是肾损害进展的独立危险因素[1]。如果得不到及时有效的治疗，患者很快会出现大量蛋白尿，并伴有肾功能进行性下降，最终进展至终末期肾衰竭，一定程度上增加了患者的病死率[2-3]。足细胞及其相关分子的损伤在糖尿病肾病早期及微量蛋白尿的发生发展中起着关键的作用，其中Nephrin、Podocin作为足细胞裂孔隔膜上的跨膜蛋白，在维持足细胞形态及肾小球滤过屏障功能中意义重大。保肾通络方是在北京中医医院肾病科协定处方保肾方Ⅱ号(生黄芪、生地黄、女贞子、水蛭等)加用虫类药(蝉蜕、地龙、全蝎)组方而成，基础研究与临床应用均验证其为治疗糖尿病肾病有效中药方剂，本研究旨在通过观察不同剂量的保肾通络方对早期DN大鼠尿液中Nephrin、Podocin排泄的影响，初步探讨保肾通络方对早期糖尿病肾病大鼠足细胞的保护作用与最佳治疗剂量。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与药物

    SPF级健康雄性SD大鼠35只，体重200～240 g，鼠龄6～8周龄，由北京市中医研究所动物室提供(合格证书编号：11400500012601)。

    保肾通络方由生黄芪30 g、党参15 g、生地黄30 g、女贞子20 g、菟丝子20 g、鬼箭羽15 g、三棱10 g、水蛭5 g、蝉蜕9 g、地龙6 g、全蝎6 g组成，水煎剂，4℃冰箱保存，每3天配置一次。药材由首都医科大学附属北京中医医院中药房提供；盐酸贝那普利片，由北京诺华制药有限公司生产(规格：10 mg×14片，国药准字:H20030514)。

    1.2 实验试剂与仪器

    链脲佐菌素(streptozocin,STZ，美国，Sigma)；柠檬酸、柠檬酸钠(国药集团化学试剂有限公司)；尿Nephrin Elisa试剂盒、尿Podocin Elisa试剂盒(北京鸿跃创新科技有限公司)等。FreeStyle?血糖仪及试纸(美国，Abbott)；低温冰箱(美国，Thermo)；MultiSkan3酶标仪(美国，Thermo)；全自动生化分析仪(美国，Beckman Coulter)。

    1.3 动物模型的建立与分组

    大鼠适应性饲养1周，随机抽取7只为空白组，其余为模型组。造模前禁食不禁水4小时，模型组单次左下腹腔注射1%链脲佐菌素溶液(以0.1 mol/L柠檬酸缓冲液冰上配置 ......