赵唯含 史瑞 杨美娟 高康丽 李宁飞 李军祥

    慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis，CAG)是临床常见的消化系统疾病，以胃黏膜上皮和腺体萎缩或伴有肠化生及不典型增生为特征表现[1]。现代医学对于本病的治疗主要是缓解症状，如应用促胃动力药、胃黏膜保护剂及抑酸剂等，而中医药凭借其优势在治疗CAG中扮演着重要角色[2]。黄芪和三七是健脾益气和活血化瘀药的代表，黄芪中的主要有效成分是黄芪甲苷，三七中的主要有效成分是人参皂苷Rg1。以往研究发现黄芪及三七可以通过激活Hedgehog信号通路关键因子改善萎缩性胃炎大鼠胃黏膜的萎缩状态。本次实验将进一步对黄芪和三七的有效成分黄芪甲苷及人参皂苷Rg1治疗CAG的作用机制进行探讨。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    健康雄性Wistar大鼠80只，体重(160±20) g，SPF级，由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，动物许可证编号：SCXK(京)20090007，饲养于北京市中医研究所SPF级动物饲养间，12小时光照/黑夜循环，相对恒温(25℃)，恒湿(75%)。

    1.2 试剂与药物

    黄芪甲苷(Astragaloside IV，AST)分子式：C41H68O14，分子量784，标准品，购自北京市药品检验所，编号：110781；人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1，GSS)：标准品，购自北京万诚科贸有限公司，纯度≥98%(HPLC); Purmorphamine购自上海浩然生物有限公司; 特异性抗体Shh购自美国CST公司，Gli-1、Ptch、SUFU、CyclinD1和β-actin购自美国abcam公司；辣根过氧化物酶(horse radish peroxidase，HRP)标记羊抗鼠或兔抗羊二抗购自北京中杉金桥生物技术有限公司；组织裂解液和BCA蛋白浓度测定试剂盒购自美国Promega公司；ReverTra Ace qPCR RT Kit和THUNDERBIRD SYBR qPCR Mix购自日本Toyobo公司；PV-9001、PV-9003免疫组化检测试剂购于北京中杉金桥生物技术有限公司。

    1.3 实验动物分组及给药

    采用幽门弹簧植入术配合高盐热淀粉糊灌胃法制备萎缩性胃炎大鼠模型[3]。造模结束后，运用随机数字表法将造模动物分为模型组、人参皂苷Rg1低剂量组、人参皂苷Rg1高剂量组、黄芪甲苷低剂量组、黄芪甲苷高剂量组、Purmorphamine组及叶酸组 ......