周晶 董笑克 马青科 金香兰 张志辰

    阿尔兹海默症(alzheimer’s disease，AD)是一种在全球范围内常见的神经退行性疾病，患者表现为记忆缺失、语言、定向力障碍、幻觉等，患者及家属的生活质量严重降低。目前，尚无有效的药物预防或逆转AD的发展。研究发现，淀粉样蛋白-β(amyloid-beta ，Aβ)激活丝氨酸蛋白激酶3β(serine protein kinase 3 β，GSK3β)，上调的微管相关蛋白Tau蛋白过度磷酸化，是AD发病关键环节。中草药及其提取物对AD的治疗具有一定的优势，中药抗AD有效物质的筛选及其机制研究是AD治疗研究的重点。中药黄连提取物黄连素具有抗炎、抗氧化等作用，可有效地改善大鼠认知缺陷和记忆力。为了进一步探究黄连素治疗AD的机制，本研究旨在通过阿尔兹海默症大鼠模型，探究不同剂量黄连素对大鼠学习和认知功能的影响，并通过对AD发病的关键蛋白GSK3β、p-Tau表达量的检测，阐释黄连素治疗AD的可能机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SPF级雄性wistar大鼠62只，6周龄，体重(220±20)g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，动物许可证编号：SYXK(京)：2019-0013。饲养于北京中医药大学东方医院动物中心，饲养级别为SPF级，5只/笼，保证正常光照节律、温度适度、环境安静，正常大鼠生长繁殖饲料饲养，自由进食和饮水。

    1.2 药物及试剂

    盐酸小檗碱(黄连素)，成都锦华药业有限公司生产，批号：180613；Aβ25-35，美国Sigma公司生产，批号：053M4804V，注射前用生理盐水将Aβ25-35配制为10 μg/μL的溶液，在37℃ 孵育1周；重组Anti-GSK3 beta抗体(Y174) ......