王韵桥 蒋筱 夏猛

    大量研究表明，失眠与肝郁之间在症状层面及疾病层面上均具有密切的联系。如有学者的调查发现，失眠患者常伴有焦虑情绪、抑郁情绪，甚至是同时伴有两种情绪障碍[1]。另外，有学者则专门对儿童进行调查后发现，很多儿童存在睡眠问题，且原因多是因学习或生活环境因素造成的不良情绪[2]。在中医学中，这一类疾病被称为肝郁证失眠，且往往治疗困难，易反复，并导致多种并发症的发生，甚至致残、致死[3]。由此可以发现，无论是不断升高的发病率还是其严重的潜在危害，肝郁失眠都需要引起高度重视。大量的文献表明，中医经典方逍遥散具有疏肝理气、健脾养血的作用，在临床上对肝郁证失眠患者的治疗中收获了显著的疗效，但是对于其治疗肝郁证失眠的具体作用机制尚不明确。

    PI3K/Akt-mTOR是一种在真核细胞中存在较广的信号通路[4-5]，对细胞自噬、凋亡和各种代谢等生命活动有着重要的调控作用[6]。本次实验中，课题组以逍遥散作为研究对象，选择临床上治疗肝郁证失眠的常用且效果明显的药物地西泮作为西药组。以PI3K信号通路为切入点，运用Real-Time PCR技术对各组大鼠海马体样本中的相关蛋白进行检测，同时结合旷场实验对各组大鼠进行行为学实验，分析逍遥散对于肝郁证失眠模型大鼠行为学的影响，为逍遥散治疗肝郁证失眠的切实疗效提供客观依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SPF级SD大鼠50只，体重(200±20) g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，动物许可证号：SCXK(湘)2016-0002，湖南省实验动物质量合格证号：43004700037830。适应性饲养1周之后开始实验。

    1.2 药品制备

    逍遥散(柴胡15 g、当归15 g、白芍15 g、白术15 g、茯苓15 g、生姜15 g、薄荷6 g、炙甘草6 g)，天王补心丹(酸枣仁10 g、柏子仁10 g、当归身10 g、天门冬10 g、麦门冬10 g、生地黄12 g)购买自广西中医药大学第一附属医院。经中药植化室鉴定符合《中国药典》2010版相关要求。

    药剂制备：加水回流提取2次，第一次加10倍水提取2小时，第二次加8倍水提取1.5小时，药液过滤，合并浓缩至含生药浓度1 g/mL ......