占天为 郭书文 陈曦 莫涵瑢 王惠 冯鹏飞 魏路路

    缺血性心脏病是全球范围内人类死亡和致残的主要原因。持续的心肌缺血会导致心脏组织的多重损害[1]。心肌梗死(myocardial infarction，MI)是冠状动脉疾病的常见表现，特征是持续性和严重心肌缺血引起部分心肌细胞死亡[2]。研究发现，凋亡是受基因控制的程序性细胞死亡，并且是心肌细胞主要的细胞死亡方式[3]。细胞凋亡在心肌梗死的发病机理中起关键作用，终末分化心肌细胞的丢失引起心肌纤维化，心室扩张，心脏重构，心脏功能逐渐下降，加剧心力衰竭的发展[4]。由于心肌细胞的再生能力有限，靶向抑制凋亡成为改善心肌缺血损伤有前景的治疗策略。研究表明，Bcl-2家族蛋白质如Bcl-2和Bax，在调节程序性细胞死亡中起重要作用[4]。本研究旨在探讨益气活血方通过调节Bax和Bcl-2的表达对心肌梗死大鼠细胞凋亡分子机制的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    从北京维通利华实验动物技术有限公司订购60只健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠，8周龄，SPF级，体重180～220 g，动物许可证编号：SCXK(京)2016-0006，实验期间将动物饲养于北京中医药大学实验动物房温度：(21±2)℃，湿度：(50±5)%，每天光照12小时。

    1.2 试剂与仪器

    1.2.1 试剂 益气活血方由5味中药组成：生黄芪50 g、生晒参10 g、当归15 g、三七6 g、川芎15 g，中药材由北京中医药大学国医堂门诊部提供。口服剂制备工艺：称取40剂益气活血方，中药提取3次，第1次加10倍量水煎煮2小时，过滤，第2、3次分别将前1次过滤后得到的药材在8倍量的水中煎煮1小时，共4小时，最后，将过滤后的溶液混匀，浓缩成含有0.82 g·mL-1生药量的中药煎剂。阳性对照药培哚普利[施维雅(天津)制药有限公司生产]，4 mg/片，国药准字：H20034053，临用时以无菌蒸馏水充分溶解。主要试剂：一抗Bax、Bcl-2、c-caspase 3(英国Abcam公司ab182733、ab196495、ab49822)，辣根酶山羊抗兔IgG二抗(北京鼎国，SH-0031)，ECL化学发光试剂盒(Thermo，34094)。

    1.2.2 仪器 Vevo770高分辨小动物超声系统(加拿大Visual Sonics公司生产) ......