郝庆勋 李国栋 韦婉 谢洁 焦扬

    “肺痹汤”为首都国医名师周平安教授治疗间质性肺疾病的常用经验方，可明显改善特发性肺纤维化患者咳嗽、气短等呼吸道症状，并有效地减少年平均肺部感染次数，提高生存质量，延长生存期。全方以益气解毒，化痰通络为法，由生黄芪、金银花、浙贝母、丹参等组成，寒热并用，补中寓通，共奏益气解毒活血、清热化痰通络之功效。本课题组前期在动物实验中发现，肺痹汤具有抗博来霉素大鼠肺纤维化作用，其主要机制可能是肺痹汤可降低博来霉素大鼠血清中细胞外基质含量[1]；在体外实验中，本课题组发现肺痹汤及其主要成分对人胚肺成纤维二倍体细胞(medical research council cell strain 5，MRC-5)的增殖具有抑制作用[2]。为进一步明确肺痹汤水煎剂及入血成分，本实验基于液相色谱-串联质谱法技术(liquid chromatography-mass spectrometry，LC-MS)，测定肺痹汤水煎剂及灌胃大鼠体内血药浓度变化，研究口服肺痹汤后其主要成分在大鼠体内的代谢变化，为该方治疗间质性肺疾病提供实验依据，为临床合理用药提供参考依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SD大鼠19只，雌雄不限，SPF级，体重(250±20)g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，动物生产许可证编号：SCXK(京)2016-0006，合格证号：11400700248337。所有动物均适应性喂养一周后使用。

    1.2 试剂与仪器

    1.2.1 试剂 肺痹汤的组成：生黄芪、金银花、浙贝母、丹参、当归、穿山龙、生甘草，购自北京同仁堂饮片有限责任公司，经鉴定为正品，符合《中华人民共和国药典》要求。肺痹汤水煎剂由北京中医药大学东方医院药房按照质量比3∶3∶2∶2∶2∶2∶1比例，浓煎成生药浓度为2.83 g/mL的复方制剂，置于4℃冰箱中低温保存。检测时将肺痹汤水煎剂稀释4倍(取5 mL复方制剂加入15 mL超纯水，置于涡旋机混匀)，取出1 mL稀释液于EP管中，置于高速冷冻离心机内离心处理(1400 rpm，10 min，4℃)，离心完毕后取80 μL上清液进行质谱检测。对照标准品：芒柄花甘(批号：OB12877)，绿原酸(批号：OB12831)，贝母素乙(批号：OB12894)，甘草酸(批号：OB12897)，甘草苷(批号：OB12809)，薯蓣皂苷(批号：OB12823)，丹酚酸B(批号：OB12871)，环黄芪醇(批号：OB12803)，丹参酮IIA(批号：OB12852) ......