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编号:1418873
基于叶绿体rbcL序列扩增的天南星药材及其常见混伪品的分子鉴定研究
http://www.100md.com 2020年6月8日 环球中医药 2020年第4期
种间,条形码,1材料与方法,1仪器和试剂,2材料,3DNA提取,4PCR扩增,5测序分析,6序列比对及N-J系统聚类树建立,2结果,1rbcL序列分析,2遗传距离分析,3基于rbcL序列的天南
     许贞 刘春生 胡小松 隋丞琳 崔秀梅 侯凤祥 顾选

    药材天南星为天南星科植物天南星Arisaemaerubescens(Wall.)Schott、异叶天南星ArisaemaheterophyllumBl.或东北天南星ArisaemaamurenseMaxim.的干燥块茎,性温,味苦辛,归肺、肝、脾经,具有散结消肿的功效[1]。天南星药材通常被加工成制天南星或胆南星饮片,具有化痰、息风止痉等功效,常用于顽痰咳嗽、风痰眩晕、中风痰壅、口眼斜等症[2],临床需求量大。此外,天南星入药能够起到祛痰、抗炎以及散结消肿的作用,所以其常用于抗肿瘤药物组方之中。有研究表明,鲜天南星水提取物可对小鼠子宫纤维瘤起到一定的抑制作用[3],且不同来源的天南星外用对大鼠外伤性血瘀有很好的治疗作用[4]。由于天南星科植物众多,全国各地用药习惯不同,往往就地取材入药,本草记载也存在同名异物,同物异名等情况,导致中药材天南星的市场基原混乱,很难辨别。市场上,天南星主流基原为天南星A.erubescens,除正品天南星外,常有天南星科其他种类如半夏属掌叶半夏Pinelliapedatisecta、半夏Pinelliaternata、菖蒲属菖蒲Acoruscalamus、千年健属千年健Homalomenaocculta等充作天南星用或混淆使用。天南星科植物多有毒,毒性反应主要表现对口腔、咽喉及皮肤黏膜有很强的刺激性[5],且不同物种毒性强度不同。吴紫君等[6]研究结果表明,天南星科3种有毒中药天南星、半夏、白附子生品均有明显的急性毒性,其中以生半夏毒性最强。因此,正品天南星的正本清源和准确鉴定对于用药安全显得十分重要。

    目前,天南星真伪鉴别的方法除性状[7]外,还有薄层鉴别法[8]、指纹图谱鉴别法[9-10]、近红外光学鉴别[11-12]等方法。虽然传统的鉴别方法能够对天南星进行鉴别,但鉴别方法复杂,适用范围较窄,且结果易受到产地、采摘时间、储存条件等因素的影响,具有一定的局限性。而传统性状鉴别需要极大的工作经验积累,无法快速普及。因此,为保证中药材临床用药的安全、有效性,亟需建立一种稳定、快速、准确的鉴别方法。自2003年首次提出“DNA条形码”这一概念,DNA条形码分子鉴定技术飞速发展,为传统形态分类学带来了新的发展机遇[13-14]。DNA条形码技术作为一种新兴的鉴定技术,可用于中药材的基原鉴定,并且具有快速、准确的特点。陈士林等[15]基于大样本量实验创建了中药材DNA条形码分子鉴定体系,并提出中药材DNA条形码分子鉴定指导原则。目前该指导原则已纳入《中华人民共和国药典》(2015版) ......

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